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학위논문 상세정보

Proteomic analysis of disulfide bond containing proteins of Helicobacter pylori 원문보기

  • 저자

    Hwang, Hyang-Ran

  • 학위수여기관

    The Graduate School of the Gyeongsang National University 대학원

  • 학위구분

    국내석사

  • 학과

    신경생물학과(협동)

  • 지도교수

  • 발행년도

    2004

  • 총페이지

    41 p.p

  • 키워드

  • 언어

    eng

  • 원문 URL

    http://www.riss.kr/link?id=T10062136&outLink=K  

  • 초록

    종자 발아는 식물의 생활 사 중에서 분화발달의 첫 단계라고 할 수 있다. 벼의 초기성장과 이후의 발육 정도를 결정하는데 있어서 종자 발아는 매우 중요한 역할을 한다고 보아야 할 것이다. 종자 발아 중 습도와 온도, 산소, 광 조건에 따라서, gibberellic acid (GA), abscisic acid (ABA), ethylene, cytokinin (kinetin) 그리고 brassino hormone과 GA 합성 저해제로 널리 사용되는 paclobutrazol (PAC) 등이 어떤 영향을 미치는지에 대한 연구가 수행되었다. 본 연구에서는 벼 종자의 발아 중에 일어나는 여러 가지 단백질 변화를 알아보기 위해서 서로 길항적인 관계를 가진 GA_(4+7), ABA처리와 GA의 합성 저해제인 PAC를 처리여 발아과정 중 단백질 생성과 변화를 2-DE로 분리하고 MALDI-TOF으로 질량 분석하여 동정하였다. 이를 위해 벼 종자를 4℃에서 48시간 동안 침지한 후 영양액이 함유되지 않은 배지상에서 0, 6,12, 24, 48, 72, 96 시간 발아시켰고 또는, 500 μM GA, 10 μM ABA, 200 μM PAC가 함유된 배지상에서 0, 6, 12, 24, 48, 72, 96시간 발아시켰고, 발아 과정 중 GA의 역할을 조사하기 위해 200 μM PAC가 함유된 배지상에서 24시간 발아 시킨 후 500 μM GA 배지에 다시 옮겨 24, 48시간 추가로 발아시켰다. 모든 처리에서 발아율과 유근 유아의 길 이를 측정 했다. 상기 조사된 시료의 유근과 유아를 포함한 배를 절제하여 페놀 추출법으로 세포 내 단백질을 추출하여 이차원전기영동을 통해 발현 차이를 보았다. 그 결과 총 665개의 단백질 중에서 255개는 발아과정에 차이를 보였으며, 증가되는 것이 95개, 감소되는 것이 68개, 새로 생성되는 것이 49개가 발현되었다. 그리고 차이 나는 단백질 중 181개의 단백질을 Matrix assisted laser desorption ionization time of flight(MALDI-TOF) mass spectromertor를 이용하여 동정한 결과 155개의 peak가 확인 되었으며, 그 중 109개의 단백질이 동정되었다. 종자 발아 중에 감소되는 단백질로는 ABA induced protein, RAB24, ABA and stress induced protein이 동정되었으며, 증가되는 단백질로는 putative fructokinase, IAA amidohydrolase, Cystein synthase, 20S proteasome-α-6, S-adenosylmethione synthetase 2 등이 동정되었다. 그리고 새로 생성된 단백질로는 L-ascorbate peroxidase, GSH-dependent dehyroascorbate reductase 등이 동정되었다. 새로 생성되면서 GA_(4+7) responsive하게 발현되는 단백질로는 NADPH-dependent oxidoreductase, Glutathione S-transfrase, β-expansin 등이 동정되었다. 종자 발아 중에 증가되거나, 새로 생성된 단백질들은 주로 발아를 증진시키거나 촉진시키는 역할을 하는 단백질로 추정되었다. 그리고 GA_(4+7) 에 responsive한 단백질들은 GA_(4+7) 신호전달 체계에 따라 발현되는 것으로 추정된다. 또한, 동정된 단백질 109개를 기능별로 나눈 결과 carbohydrate metabolism protein processing-degradation, stress나 defense에 관련되는 단백질이 각각 28%, 19%, 12%를 차지하였다. 종자가 발아하는 동안에 저장 양분을 분해 이용하는데 관련된 단백질이나, 초기성장과 여러 가지 스트레스에 방어적인 단백질들이 많이 발현되는 것을 확인 할 수 있었다. 따라서 본 연구에서 밝혀진 종자 발아에 특이적인 단백질의 발현 메커니즘과 발아에 지배적인 영향을 미치는 단백질 연구에 기초적인 자료를 제공 할 수 있었다.


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