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학위논문 상세정보

免疫缺乏 마우스를 利用한 사람의 腦腫瘍 細胞株의 大腦內 異種移植 모델 開發 원문보기
Development of intracerebral human brain tumor transplanted in NOD/SCID mouse

  • 저자

    여인욱

  • 학위수여기관

    東亞大學校 大學院

  • 학위구분

    국내석사

  • 학과

    의학과

  • 지도교수

  • 발행년도

    2000

  • 총페이지

    iv, 26p.

  • 키워드

    면역결핍 뇌종양 세포주 대뇌 이종이식;

  • 언어

    kor

  • 원문 URL

    http://www.riss.kr/link?id=T10065610&outLink=K  

  • 초록

    사람의 뇌종양 세포주인 U-87MC와 비비만성당뇨/중증복합면역결핍 (Nonobese dibetic-severe combined immunodeficient: NOD/SCID) 생쥐를 사용하여 마우스 뇌내에 사람 뇌종양 모델을 시도하였다. 마취한 NOD/SCID 마우스를 뇌정위기구에 고정 후 두피를 박리한 뒤 소형 드릴로 두개골의 중앙선에서 2 mm 오른쪽 두정골에 직경 1 mm의 천공을 뚫었다. Hamilton 주사기에 장착된 30G needle을 두개골 표면으로부터 2mm 깊이까지 넣고, 20 μl의 인산완충용액에 부유시킨 5×10^(6) 개의 세포주를 약 10분간에 걸쳐 천천히 주사하였다. 천자바늘을 약 5 분간 그대로 두어 주위 조직으로의 침투를 도모하였으며 약 5 분간에 걸쳐서 서서히 주사바늘을 뽑고, 피부를 봉합하였다. 2주 후 작은 루프를 장착한 1.5 Tesla Siemens Magnetom Vision을 사용한 자기공명영상법으로 뇌내에 종양이 있음을 확인한 뒤, 생쥐를 희생하여 뇌조직의 병리조직 소견을 관찰하였다. 또한 종양세포를 생쥐의 등에 피하주사하여 발생한 종양의 병리조직 소견을 비교관찰하였다. 자기공명영상소견에서 암세포를 주사한 부위에 뇌실로 돌출하는 신생 고형물을 관찰할 수 있었으며 반대편 뇌실에도 전이된 양상을 볼 수 있었다. 따라서 자기공명영상법으로 직경 약 1mm 이하의 종양까지 관찰할 수 있음을 알 수가 있었다. 병리조직 소견상 뇌내 세포주 주입 모델들에서는 종양 세포들이 주위의 조직등으로 침윤하는 모습을 볼 수가 있었으나, 피하모델에서는 주위 조직으로 침윤하는 양상은 나타내지 않았으며 신생물 중앙부에 교모세포종의 특징적인 괴사소견을 나타내었다. NOD/SCID 마우스를 사용한 인체 뇌종양 세포주 뇌내 주입 모델은 기존의 피하 세포주 주입 모델에 비하여 실제 임상 상황을 더 잘 반영할 것으로 생각되므로 이 모델은 장차 사람의 뇌종양에 대한 여러 가지 치료법의 연구에 크게 기여할 것으로 생각된다.


    Intracerebral human brain tumor model is developed using U-87MG glioblastoma cell line and nonobese diabetic-severe combined immunodeficient (NOD/SCID) mice. A small burr hole was made at frontal lobe region 2 mm right of murine skull mid-line. We put a 30 gauge needle attached to 50 ml Hamilton syringe into murine cerebrum about 2 mm deep from skull surface using stereotactic instrument and injected 5×106 U-87MG cells in 20 ml PBS in 10 minutes. About 2 weeks later, MR imaging using 1.5 Tesla Siemens Magnetom Vision with small loop was done to diagnose whether tumor is growing or not. After MRI, mice were sacrificed and H & E stain was done to confirm the mass as a glioblastoma. We also made subcutaneous models of glioblastoma by injecting U-87MG cell line at the back of NOD/SCID mouse. In in situ brain tumor transplantation group, a solid mass was seen at the injection site identified by the MRI and it protruded into the ventricle. Two small metastatic masses at the opposite ventricle were also visible. A mass less than 1 mm diameter could be easily detected by MRI. Masses showed several characteristic features of human glioblastoma under microscopic investigation. Intracranial model showed partial infiltration into surrounding tissue and subcutaneous model showed geographical necrosis at the center region. This model partially represents the biology of human brain tumor in situ and so can be used as a valuable in vivo xenograft model to study the effectiveness various therapeutic modalities against human brain tumor. MRI can be used as a useful tool to evaluate the development of these diseases in the mouse brain.


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