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Electrical Characterization of Inwardly Rectifying K^(+) Channel in Rat Airway Epithelia : 쥐의 기관 상피세포에서 내향정류성 K^(+)채널(IRK)의 전기적 특징에 관한 연구 원문보기

  • 저자

    이승한

  • 학위수여기관

    The Graduate School of Dong-A University

  • 학위구분

    국내박사

  • 학과

    Pharmacology

  • 지도교수

  • 발행년도

    2000

  • 총페이지

    iv, 22p.

  • 키워드

    IRK 내향정류성 상피세포 K^(+)채널;

  • 언어

    eng

  • 원문 URL

    http://www.riss.kr/link?id=T10067409&outLink=K  

  • 초록

    쥐의 기관상피세포에서 nystatin으로 상피측 막을 처리한후 양측으로 125 mM K^(+) 이온이 포함된 용액에서 내향 정류성 K^(+) 채널의 전기적 특징을 관찰하였다. 내향정류성 K^(+) 채널에 대한 억제제의 효능은 Ba^(2+)>Cs^(+)>>lybenclamide>>TEA의 순서였다. 내향정류성 K^(+) 채널은 G prtein 활성을 통한 세포내 Ca^(2+)을 증가시키는 carbachol이나 세포내 Ca^(2+)을 비활성화 시키는 BAPTA/AM처리에 의해 영향을 받지 않았다. 기저막측에 Ca^(+) 투여시 내향 정류성 K^(+) 채널은 막전압 의존성 flickering 전류가 유도되었다. 고정전압 -100 mV에서 flickering의 빈도는 농도증가에 의해 증가되었고 Cs^(+) 농도 2mM에서의 flickering 빈도는 막전압이 과분극됨에 따라 증가되었다. Cs^(+) 존재시 내향정류성 K^(+) 전류의 전류-전압곡선은 예리한 커브를 이루어 내향정류성 K^(+) 채널이 multi ion에 의한 억제성 효과를 보였다. 상피측 막에 nystatin 투여후 전압차 (PD)는 Nernst 식에 따라 움직였고 Ba^(2+)에 의해 PD값은 유지되지 못했다. RT-PCR 결과 쥐의 기관상피세포에서 Kir2.1이 사람의 비점막 상피세포에서 Kir2.1, Kir2.2가 존재함을 확인하였다. 내향정류성 K^(+) 전류는 T84 인간의 대장상피세포에서는 관찰되지 않았으나 carbachol에 의한 일시적 K^(+) 전류는 관찰되었다.


    The rat primary cultured-airway monolayer has been an excellent model for deciphering the ion channel after nystatin permeabilization of its basolateral or apical membrane (Hwang et al., 1996; Hwang et al., 2000). After apical membrane permeabilization of rat primary cultured-airway monolayer, inwardly rectifying K+ (IRK) currents were observed across the basolateral membrane in symmetrical high K+ (125 mM)/Cl- free solution in this study. The potency of K+ channel inhibitors against IRK current was Ba2+>Cs+>>glybenclamide>>TEA. IRK current was not affected by carbachol (100 mM) or BAPTA/AM treatment (1 mM). The application of basolateral Cs+ caused a voltage-dependent flickering. The frequency of flickering current (holding voltage = -100 mV) increased with increase in concentration of basolateral Cs+ (0.05 5 mM) and in degree of hyperpolarization. Addition of basolateral Cs+ blocked inward current strongly at 100 mV and hardly at all at 60 mV, giving a sharp curvature to the I-V relation. The potential difference (PD) across the basolateral membane after apical membrane polarization varied by Nernst equation and was completely inhibited by basolateral Ba2+. RT-PCR analysis revealed the presence of Kir2.1 cDNA in both intact and cultured rat airwya epithelia. IRK current was not recorded either across the basolateral membrane of T84 human colonic epithelia and apical membrane of rat airway epithelia.


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