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Studies of antiviral screenings against a gammaherpesvirus using natural products 원문보기

  • 저자

    이소희

  • 학위수여기관

    고려대학교 생명환경과학대학원

  • 학위구분

    국내석사

  • 학과

    생명분자유전공학과

  • 지도교수

    송문정

  • 발행년도

    2014

  • 총페이지

    63p

  • 키워드

    gammaherpesvirus antiviral effect screening natural products;

  • 언어

    eng

  • 원문 URL

    http://www.riss.kr/link?id=T13541883&outLink=K  

  • 초록

    Epstein-Barr virus (EBV)와 Kaposi's sarcoma-associated herpesvirus (KSHV)를 포함하는 인체감마허피스바이러스는 사람에서 각종 감염성 질환과 종양을 유발하기 때문에 중요한 병원균으로 인식 되고 있으나, 현재까지 효과적인 치료제가 부족한 상황이다. 본 연구에서는 허피스바이러스에 항바이러스 효과를 나타내는 천연물을 스크리닝할 수 있는 시스템을 제안하고자 하였다. 스크리닝 시스템은 총 두 단계의 관찰을 시행하도록 구성 되었으며, 관찰 대상은 EBV 및 KSHV에 상동체인 마우스감마허피스바이러스 68 (murine gammaherpesvirus 68, MHV-68)을 접종한 후, 각각 48시간과 72시간 동안 배양한 세포들이었다. 실험에 사용된 천연물은 총 672종 이었으며, 국내 자생식물의 잎이나 가지로부터 추출되었다. 해당 스크리닝 시스템 시행을 통하여, 항바이러스 효과가 있는 것으로 나타나 스크리닝된 1차 후보 천연물들의 효과는 plaque 저해 에세이 (plaque reduction assay, PRA)을 실행하여 확인 하였다. 그 결과, 스크니링 시스템의 두 번째 관찰 단계를 시행함으로써, 항바이러스 효과가 강함에도 불구하고, 그 효과를 간과할 수 있는 천연물을 스크리닝할 수 있도록 해준다는 사실을 확인 하였다. 또한, 72시간 동안 배양한 후 관찰하는 것이, 48시간 배양 후에 관찰 하는 것보다 항바이러스 효과가 좋은 것처럼 보이는 가짜 후보를 선택할 확률을 낮춰준다는 사실을 확인 하였다. 이러한 결과들을 통해 ,두 단계로 구성된 항바이러스 스크리닝 시스템을 72시간 배양 후 시행하는 것이, 많은 수의 천연물 후보들의 항바이러스 효과를 구분하는데 유용하게 사용될 수 있음을 알 수 있었다.


    Gammaherpesviruses including Epstein-Barr virus (EBV) and Kaposi's sarcoma-associated herpesvirus (KSHV) are important human pathogens since they cause various infectious disease and tumors, but there are no efficient antiviral treatments until now. Here I propose an effective antiviral screening system of natural product against gammaherpesviurses. The screening system was organized into 2 monitoring steps with a 48 h or 72 h incubation period using murine gammaherpesvirus 68 (MHV-68), which is homologue to EBV and KSHV. Total 672 natural products extracted from branches and leaves of grown or wild plants were tested. Antiviral activities of the primary hits from the screenings were confirmed by plaque reduction assays. The results indicate that second monitoring of the screening system assured additional candidates with strong antiviral activity, otherwise neglected. In addition, 72 h incubation during screening lowered false positive rate than 48 h incubation. These results suggest that our 2-step monitoring system with 72 h incubation period identify antiviral activity of natural product as a high throughput screening.


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