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Improved Phosphotyrosine Analysis by TLC and HPLC

Song, Young-Me    (College of Pharmacy, Chonnam National University   ); Yoo, Gyurng-Soo    (College of Pharmacy, Chonnam National University   ); Lee, Seung-Ki    (College of Pharmacy, Seoul National University   ); Choi, Jung-Kap    (College of Pharmacy, Chonnam National University  );
  • 초록

    We describe here the conditions of thin layer chromatography (TLC) and high pressures liquid chromatography (HPLC) to improve the analytical method of phosphotyrosine (p-Tyr) in biological sample. TLC was performed on silica plate with the mixture of propanol and water (2.1 : 1 v/v) as a mobile phase and $R_1$ values were 0.42, 0.39 and 0.33 for phosphotyrosine, phosphothreonine and phosphoserine, respectively. HPLC was performed on $NH_2$ column with a mobile phase of potassium biphosphate solution by UV deterction at 192 nm. The optimum condition of HPLC was obtained at 0.01 M, pH 4.5 with a clear separation within 12 min. These procedures have been applied to the analysis of phosphotyrosine obtained from tyrosine-phosphorylated enolase. Both TLC and HPLC methods were suitable to analyze tyrosine-phosphorylated protein without being affected by contaminants from hydrolysates.


  • 주제어

    Phosphotyrosine .   Phosphoamino acids .   Phosphorylated protein .   TLC .   HPLC.  

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  • 이승기 (26)

  • Choi, Jung-Kap (17)

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