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Design and Cloning of the Gene for a Novel Insulin Analogue, $(B^{30}$-Homoserine) Human Insulin

Nam, Doo-H.    (College of Pharmacy, Yeungnam University   ); Ko, Jeong-Heon    (Molecular Biology Laboratory, Genetic Engineering Research Institute   ); Lee, Seung-Yup    (College of Pharmacy, Yeungnam University  );
  • 초록

    In order to prepare a novel human insulin analogue suhbstituted with homoserine at B $^{30}$ / position, (B $^{30}$ /-homoserine) human insulin, a synthetic gene was designed by linking directly a gene for B chain with that for A chain. This gene was constructed by enzymatic joining of 10 different synthetic oligonucleotides, and then inserted at the polylinker region of pUC19 plasmid. To achieve a high level of gene expression, the gene fusion technique region of pUC19 plasmid. To achieve a high level of gene expression, the gene fusion technique was employed using amino terminal regions of lacZ gene up to Clal or hpal, and either of them has been located under tac promoter. The chemical induction of these fused genes by isopropyl-.betha.-D-thiogalactopyranoside (IPTG) gave a satisfactory level of expression in Escherichia coli harboring the ocnstructed plasmids. It was observed that the fused gene product as a single chain insulin precusor was produced more than 30% of total cell protein of E. coli as a form of inclusion body.


  • 주제어

    Recombinant insulin .   Insulin .   analogue .   B $^{30}$ /-homoseine insulin .   Single chain insulin precursor .   Gene fusion.  

  • 이 논문을 인용한 문헌 (1)

    1. 2001. "" Biotechnology and bioprocess engineering, 6(2): 144~149     

 저자의 다른 논문

  • Lee, Seung-Yup (1)

    1. 1992 "Ethanol Fermentation in Lactose Medium Using a Fusant Strain of Saccharomyces cerevisiae and Kluyveromyces fragilis" Journal of microbiology and biotechnology 2 (2): 108~114    

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