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Membrane strip을 이용한 지질단백질 Cholesterol 측정시스템의 개발
Development of Membrane Strip Assay System for Lipoprotein Cholesterol

신인수    (고려대학교 자연과학대학 생물공학과   ); 백세환    (고려대학교 자연과학대학 생물공학과  );
  • 초록

    가정용 혈중 cholesterol 측정시스템을 개발하고자, 그 성능을 조절할 수 었는 벤수들의 최적화가 수 행되었다. 시스템의 주요 구성성분은 분석에 요구되는 효소들 (cholesterol esterase, cholesterol oxidase, 그리고 horseradish peroxidase) 이 부동화된 nitrocellulose membrane strip과 비 이온세척제 (Tri­t ton X-1OO) 및 발색물질 (3,3'-diaminobenzidine) 이 포함된 시료운반용액이다. 시료와 운반용액이 훈 합된 수용액을 membrane의 하단으로부터 흡수시키 면 모세관현상에 의해 시료는 부통화된 효소층으로 전달되어 연속효소반응이 일어난다. 마지막 효소반 응에서 발색물질은 산화되고 그에 따라 cholesterol 농도에 비례한 특정색이 신호로써 발생된다. 그 신호세기에 대해 효소들의 부동화조건과 운반용액의 화학조성이 최적화되었다. 최적조건 하에서 구성된 측정시스템의 농도응탑곡선은 혈중 cholesterol 농도를 측정하기에 충분히 높은 민감도를 나타내었다.


    To develop a home-version assay system for plasma lipoprotein cholesterol, variables that can control the assay performance were optimized. The system was constructcd by using two major components: nitrocellulose membrane strip with immobilized enzymes (cholesterol esterase, cholesterol oxidase, and horseradish peroxidase); and sample carrier solution containing non-ionic detergent (Triton X-100) and chromogen (3,3'-diaminobenzidine). Once a sample combined with the carrier was absorbed from the bottom of the strip, cholesterol was delivered by capillary action to the immobilized enzymes and a sequential reactions took place. In the final reaction, the chromogen was oxidized and then generated a color as signal that was proportional to the concentration of cholesterol. The signal intensity was enhanced by optimizing conditions for the immobilization of enzymes and the chemical composition of carriel. Under these conditions, a dose-response curve was obtained and revealed a high sensitivity enough to measure the cholesterol in blood.


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