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한국균학회지 = The Korean journal of mycology v.25 no.4 = no.83, 1997년, pp.257 - 267   피인용횟수: 2

Phellinus sp.의 분리 및 균사체의 액체배양
Isolation and Mycelial Cultivation Submerged of Phellinus sp.

강태수   (강원도 농촌진흥원CC0187065  ); 이동기   (강원대학교 환경생물공학부UU0000037  ); 이신영   (연세대학교 생물산업소재 연구센터UU0000936  );
  • 초록

    강원도 양양군 일원 야산의 뽕나무에서 자생하고 있는 상황버섯 형태의 자실체를 채집하고, 그 자실체로부터 Phellnus속의 한 균주를 분리동정하였으며, 액체배양에 의하여 분리 균사체의 대량생산을 위한 배양조건, 배지조성 및 배양장치의 영향을 조사하였다. 자실체는 표면이 검으며 거칠고, 갓의 안쪽은 황갈색으로 평평하였으며, 자실층이 두터웠고(5-7 cm), 말굽형으로 조직이 매우 단단하여 전형적인 상황버섯의 형태를 나타내었다. 또, 조직 일부를 water agar에 이식하여 순수분리한 결과, 분리된 균사체는 황갈색으로, PDA 평판배지에서 자갈색의 색소를 분비하였으며, 균사는 clamp connection을 형성하지 않았고, 많은 branch가 있었다. 또 laccase, tyrosinase 및 peroxidase activity를 가지고 있어, 본 균주는 Phellinus속의 한 균주로 확인되었다. 플라스크 배양에서 균사체 생성을 위한 최적배양조건은 접종비 5%(v/v), 배지액량 70 mL, 교반속도 150rpm, 초기 pH 6, 배양온도 $30^{\circ}C$ 및 배양기간은 8일이었다. 또, 반응표면분석에 의한 최적 배지조성은 glucose 12.12 g/L, sucrose 12.12 g/L, yeast extract 11.15 g/L, malt extract 11.15 g/L, $KH_2PO_4$ 0.855 g/L 및 $CaCl_2$ 0.855 g/L 이었으며, 배양 4일 및 8일 후 균사체량은 각각 1.95 및 9.89 g/L 이었고, 최대 비생육속도 $0.020\;hr^{-1}$ , 생산성은 1.25 g/L/day이었다. 그러나 서로 다른 3종의 배양장치를 사용한 결과, 3 L air-lift fermentor에서 통기량 2.5 vvm으로 4일간 배양하였을 때, 약 7.5g/L의 균사체를 얻을 수 있었으며, 이때, 최대 비증식속도는 $0.033\;hr^{-1}$ , 생산성은 1.9g/L/day로, 같은 기간내 플라스크 배양시 보다 각각 1.7 및 4.2배가 향상된 결과를 얻을 수 있었다.


    Fruit bodies similar to the Phellinus sp. residing on the mulberry were collected at Yang-yang in Kang-won-do province and one strain of Phellinus sp. was isolated from the fruit bodies. For mass production of the isolated mycelia in a submerged culture, the culture conditions, medium composition, and the effect of various culture systems on the mycelial growth, were investigated. The morphological characteristics of the fruit body were as follows: covered with blackish to black and rough, lower surface with yellowish-brown to dull-brown and smooth, 5-7 cm thick and hard woody. Also, the pure cultured mycelia showed yellowish-brown color, capability of purplish-brown pigment production on the PDA plate media, no-formation of clamp-connection, much binding branch, and enzyme activities such as laccase, tyrosinase and peroxidase. Therefore, pure cultured strain was identified to be Phellinus sp. In the flask culture, the optimum culture conditions for the mycelial production were obtained after cultivation of 8 days at inoculum level of 5%(v/v), media volume of 70 mL, 150 rpm, initial pH 6, and temperature of $30^{\circ}C$ . Optimum medium composition from the response surface analysis were determined to be glucose 12.12 g/L, sucrose 12.12 g/L, yeast extract 11.15 g/L, malt extract 11.15 g/L, $KH_2PO_4$ 0.855 g/L and $CaCl_2$ 0.855 g/L. The production of the mycelia after 4 and 8 days of cultivation was 1.95 and 9.89 g/L, respectively. The maximum specific growth rate and productivity were $0.020\;hr^{-1}$ and 1.25 g/L/day, respectively. Among the three different culture systems for the growth of mycelia, the maximum mycelial dry weight of 7.5 g/L was obtained after cultivation of 4 days in the air-lift fermentor under aeration rate of 2.5 vvm. The maximum specific growth rate and productivity were $0.033\;hr^{-1}$ and 1.9 g/L/day, respectively, which were about 1.7 and 4.2 times higher than those of flask culture.


  • 주제어

    Phellinus sp.   .   Isolation .   Mycelial growth .   Sumerged culture.  

  • 참고문헌 (22)

    1. 목질진흙버섯(Phellinus linteus)의 항암성분에 관한 연구 , 김신숙 , / v.,pp.,
    2. 목질진흙버섯(Phellinus linteus)의 면역활성에 관한 연구 , 김혜경 , / v.,pp.,
    3. 현대실험계획법 , 박성현 , / v.,pp.428-439,
    4. 고등균류 균사체의 면역조절 기능성에 관한 연구 , 배만종;박무희;이재성 , 한국균학회지 / v.24,pp.142-148,
    5. 배양조건에 따른 상황버섯의 다당류 생산 및 단당류 구성 변화 , 이재훈;조수묵;고경수;유익동 , 한국균학회지 / v.23,pp.325-331,
    6. 목질진흙버섯균 Phellinus linteus의 균사체 생육에 미치는 주요 인자에 관한 연구 , 지정현;하태문;김영호;노영덕 , 한국균학회지 / v.24,pp.214-222,
    7. 微生物의 分類와 同定 , 長谷川武治 , / v.,pp.139-154,
    8. 菌類硏究法 , 靑島淸雄;椿 啓介;三浦宏一郞 , / v.,pp.297-304,
    9. The fungi, Vol. IVB , Ainsworth, G.C.;Sussman, A.S. , / v.,pp.417,
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    14. Antitumor action of some basidiomycetes, especially Phellinus linteus , Ikekawa, T.;Nakanishi, M.;Uehara, N.;Chihara, G.;Fukuoka, F. , Gann / v.59,pp.155-157,
    15. Immunomodulatory substances of fungal origin , Jong, S.C.;Birmingham, J.M.;Pai, S.H. , J. Immunol. Immunopharmacol. / v.11,pp.115-122,
    16. Phellinus (Hymenochaetaceae) , Larsen, M.J.;Cobb-Poulle , / v.,pp.1-6,
    17. Immunostimulating activity and characterization of polysaccharides from mycelium of Phellinus linteus , Lee, J.H.;Cho, S.M.;Song, K.S.;Han, S.B.;Kim, H.M.;Hong, N.D.;Yoo, I.D. , Journal of Microbiology and Biotechnology / v.6,pp.213-218,
    18. Antitumor studies on some extracts of basidiomycetes , Shibata, S.;Nishikawa, Y.;Mei, C.F.;Fukuoka, F.;Nakanishim, M. , Gann / v.59,pp.159-161,
    19. Identification of wood-in-habiting Apyllophorales in pure culture , Staplers, J.A. , / v.,pp.3-41,
    20. Icons of medical fungi from China , Ying, J.;Mao, X.;Ma, Q.;Zong, Y.;Wen, H. , / v.,pp.173-187,
    21. ${\alpha}$-mannosidase and mannanase of some woodrotting fungi , Zouchova, Z.;Kocourek, J.;Musilek, V. , Folia Microbiol. / v.22,pp.61-65,
    22. Separation and properties of ${\alpha}-mannosidase$ and mannanase from the basidiomycete Phellinus abietis , Zouchova, Z.;Kocourek, J.;Musilek, V. , Folia Microbiol / v.22,pp.98-105,
  • 이 논문을 인용한 문헌 (2)

    1. 2004. "Optimal Conditions of Mycelial Growth and Exopolysaccharide Production in Submerged Culture of Phellinus baumii" 생명과학회지 = Journal of life science, 14(1): 51~56     
    2. 2008. "" Mycobiology, 36(3): 178~182     

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