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Effect of Protease Inhibitors on Degradation of Recombinant Human Epidermal Growth Factor in Skin Tissue

Ryou, Hae-Won   (College of Pharmacy, Sung Kyun Kwan UniversityUU0000759  ); Lee, Jang-Won   (College of Pharmacy, Sung Kyun Kwan UniversityUU0000759  ); Kyung, Kyung-Ae   (College of Pharmacy, Sung Kyun Kwan UniversityUU0000759  ); Park, Eun-Seok   (College of Pharmacy, Sung Kyun Kwan UniversityUU0000759  ); Chi, Sang-Cheol   (College of Pharmacy, Sung Kyun Kwan UniversityUU0000759  );
  • 초록

    Recombinant human epidermal growth factor (rhEGF), a polypeptide of 53 amino acid residues, is subject to degradation by numerous enzymes, especially proteases, when it is applied on the skin for the treatment of open wound. Amastatin, aprotinin, bestatin, EDTA, EGTA, gabexate, gentamicin, leupeptin, and TPCK were investigated for the possible protease inhibitors, which may use to protect rhEGF from degradation by the enzymes in the skin. Skin homogenates containing protease inhibitors and rhEGF were incubated at $37^{\circ}C$ for 30 minutes. After the reaction was stopped with trifluoroacetic acid, the amount of rhEGF remaining in the sample was determined with an HPLC method. The percentages of rhEGF degraded, at the skin/PBS ratio of 0.25, in the mouse, rat, and human skin homogenate were 85%, 70%, and 46%, respectively. The degree of degradation of rhEGF in the cytosolic fraction was higher than that in the membrane fraction and these enzyme reactions were completed in 30 minutes. Bestatin, EGTA, and TPCK showed significant inhibitory effects on the degradation of rhEGF in the two fractions (p


  • 주제어

    rhEGF .   Skin .   Protease inhibitor.  

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