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Journal of microbiology and biotechnology v.7 no.1, 1997년, pp.8 - 12   피인용횟수: 2

Overproduction of Escherichia coli D-Xylose Isomerase Using ${\lambda}P_L$ Promoter

Park, Heui-Dong   (Department of Food Science and Technology, Kyungpook National UniversityUU0000096  ); Joo, Gil-Jae   (Department of Agricultural Chemistry Kyungpook National UniversityUU0000096  ); Rhee, In-Koo   (Department of Agricultural Chemistry Kyungpook National UniversityUU0000096  );
  • 초록

    In order to overproduce D-xylose isomerase, the Escherichia coli D-xylose isomerase (D-xylose ketol-isomerase, EC 5.3.1.5) gene (xylA) was fused to ${\lambda}P_{L}$ promoter. The promoterless xylA gene containing the ribosome binding site and coding region for D-xylose isomerase was cloned into a site 0.3 kb downstream from the ${\lambda}P_{L}$ promoter on a high copy number plasmid. An octameric XbaI linker containing TAG amber codon was inserted between 33rd codon of ${\lambda}N$ and the promoterless xylA gene. The resulting recombinant plasmid (designated as pPX152) was transformed into E. coli M5248 carrying a single copy of the temperature sensitive ${\lambda}cI857$ gene on its chromosomal DNA. When temperature-induced, the transformants produced 15 times as much D-xylose isomerase as that of D-xylose-induced parent strain. The amount of overproduced D-xylose isomerase was found to be about 60% of total protein in cell-free extracts.


  • 주제어

    E.   coli .   D-xylose isomerase .   overproduction .   xylA .   ${\lambda}P_L$ promoter.  

  • 이 논문을 인용한 문헌 (2)

    1. 1999. "" Journal of microbiology and biotechnology, 9(6): 789~793     
    2. 2001. "" Journal of microbiology and biotechnology, 11(6): 1002~1010     

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  • Joo, Gil-Jae (45)

  • Rhee, In-Koo (99)

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