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배양액과 산소농도가 돼지난포란의 체외성숙과 배발달에 미치는 영향
Effects of Different Media and Oxygen Concentrations on In Vitro Maturation and Development of Porcine Follicular Oocytes

천행수   (충남대학교 동물자원학부UU0001302  ); 한만희   (축산연구  ); 김종화   (충남대학교 동물자원학UU0001302  ); 박병권   (공주대학교 영상보건대학 특수동물학UU0000178  ); 이규승   (충남대학교 동물자원학UU0001302  ); 서길웅   (충남대학교 동물자원학부UU0001302  );
  • 초록

    본 실험은 돼지체외수정란을 생산하는데 적합한 배양액과 산소조건을 구명하기 위하여 NCSU(North Carolina State University)-23, PZM(Porcine Zygotes Medium)-3, PZM-4 및 TCM(Tissue Culture Medium)-199 배양액과 5% 산소조건(39, 5% $O_2$ , 5% $CO_2$ , 90% $N_2$ 및 포화습도) 및 20% 산소조건(39, 5% $CO_2$ 및 포화습도)에서 돼지 미성숙난포란의 체외성숙과 체외배발달을 실시하였다. 본 연구에서 얻어진 결과를 요약하면 다음과 같다. 1) 돼지 난포란을 5 및 20% 산소조건하에서 NCSU-23, PZM-3, PZM-4 및 TCM-199 배양액에 44시간 동안 성숙을 유도한 결과 난핵포붕괴율과 핵성숙률에 있어서 산소조건 및 배양액간 유의적(p>0.05)차이는 없었다. 2) 체외수정을 실시한 결과 정자 침투율, 자ㆍ웅전핵형성률, 다정자 침입률 및 평균정자수에 있어서 산소조건 및 배양액간에 유의적인 차이가 없었다. 3) 체외수정을 실시한 후, 5 및 20% 산소조건의 NCSU-23, PZM-3, PZM-4 및 TCM-199 배양액에서 배양하여 배발달에 미치는 영향을 조사한 결과, 난할률에 있어서는 유의적(p<0.05)인 차이가 없었으며. 배발달 7일째 배반포기 발달률에 있어서 5% 산소조건에서는 PZM-3 배양액이, 20% 산소조건에서는 NCSU-23 배양액이 유의적(p<0.05)으로 높은 결과를 나타냈다. 4) 배발달 7일째 배반포기 배의 세포수를 조사한 결과, 내부세포괴세포수와 총세포수는 산소조건과 배양액간에 통계적인 유의성이 인정되지는 않았으나, 5% 산소조건에서 PZM-3 배양액(36.8 $\pm$ 6.5개)이 다소 높은 총세포수를 나타냈다. 위의 결과를 종합하면 돼지체외수정란의 생산에는 5% 산소조건에서 PZM-3 배양액에서 배발달을 유도하는 것이 배반포기 발달률과 세포수에 있어 효과적이라고 판단된다.


    The present study was carried out to examine the effect of four different media (NCSU (North Carolina State University)-23, PZM (Porcine Zygotes Medium)-3, PZM-4 and TCM (Tissue Culture Medium)-l99) and two oxygen concentrations (39 , 5% $O_2$ , 5% $CO_2$ and 90% $N_2$ , 5% $CO_2$ in air) on in vitro production of porcine IVM/IVF embryos. The results were summarized as follows: The rates of GVBD and nuclear maturations were not significantly different (p>0.05) for 44 hours of culture with four media in two oxygen concentrations. The rates of polyspermy, penetrated sperm(s) and male and female prouclei formation were not significantly different (p>0.05). among four media in two oxygen concentrations. The cleavage rates were not significantly different (p>0.05) among four media in two oxygen concentrations. At day 7 under gas atmosphere of 5% $O_2$ , 5% $CO_2$ and 90% $N_2$ , the blastocyst formation was significantly higher (p $\pm$ 2.4) than other media. Also, NCSU-23 medium gave high rate of blastocyst formation at day 7 under gas atmosphere of 5% $CO_2$ in air (p 0.05) among four media in two oxygen concentrations. However, the observed total cell number was higher in PZM-3 medium (36.8 $\pm$ 6.5) than other madia. In conclusion, these results suggested that in vitro production of porcine embryos in PZM-3 medium under a gas atmosphere of 5% $O_2$ , 5% $CO_2$ and 90% $N_2$ was effective on the blastocyst formation rate and total blastocyst cell number.


  • 주제어

    Porcine IVM/IVF embryo .   PZM-3 .   Low $O_2$ concentration.  

  • 참고문헌 (30)

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  • 천행수 (4)

    1. 2003 "산소조건 및 Catalase가 돼지난포란의 체외성숙과 배발달에 미치는 영향" 韓國家畜繁殖學會誌 = Korean journal of animal reproduction 27 (2): 115~123    
    2. 2003 "$\beta$-Mercaptoethanol의 첨가배양이 돼지난포란의 체외성숙과 배발달에 미치는 영향" 韓國家畜繁殖學會誌 = Korean journal of animal reproduction 27 (2): 125~133    
    3. 2003 "프로게스타겐이 한국 재래산양의 발정동기화 및 과배란유기에 미치는 영향" 韓國家畜繁殖學會誌 = Korean journal of animal reproduction 27 (3): 241~248    
    4. 2004 "PZM 배양액이 돼지체외수정란의 배발달에 미치는 영향" Reproductive & developmental biology = 한국동물번식학회지 28 (2): 113~117    
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