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Bulletin of the Korean Chemical Society v.26 no.2, 2005년, pp.260 - 264   피인용횟수: 3

Characterization of the Catalytic Properties of Recombinant Acetohydroxyacid Synthase from Tobacco

Kim, Joung-Mok    (Department of Chemistry, Hanyang University   ); Choi, Jung-Do    (School of Life Sciences, Chungbuk National University   ); Kim, Bok-Hwan    (Department of Health Science, Korea National Open University   ); Yoon, Moon-Young    (Department of Chemistry, Hanyang University  );
  • 초록

    The nature of the active site of Tobacco acetohydroxyacid synthase (AHAS) in the substrate- and cofactorbinding was studied by kinetics and fluorescence spectroscopy. The substrate saturation curve does not follow Michaelis-Menten kinetics at different temperatures (7, 21 and 37 ${^{\circ}C}$ ), pH (6.5, 7.5 and 8.5) and buffers (Tris-HCl and MOPS). The concentration of one half of the maximum velocity ( $S_{0.5}$ ) decreased in the following order: pyruvate $\gt$ ThDP $\approx$ $Mg^{+2}$ $\gt$ FAD. However, the catalytic efficiency (K $_{cat}/S_{0.5}$ ) inversely decreased in the following order; FAD $\gt$ $Mg^{+2}$ $\approx$ ThDP $\gt$ pyruvate, indicating that the cofactors by in decreasing order; FAD, $Mg^{+2}$ , ThDP, affect the catalysis of AHAS. The dissociation constant ( $K_d$ ) of the intrinsic tryptophan fluorescence decreased with the same tendency of the concentration of one half of the maximum velocity ( $S_{0.5}$ ) decreasing order. This data provides evidence that the substrate and cofactor binding natures of the active site, as well as its activation characteristics, resemble those of other ThDP-dependent enzymes.


  • 주제어

    Acetohydroxyacid synthase .   Kinetics .   Fluorescence .   Tobacco.  

  • 참고문헌 (22)

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  • 이 논문을 인용한 문헌 (3)

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    2. 2008. "" Bulletin of the Korean Chemical Society, 29(9): 1823~1826     
    3. 2010. "" Bulletin of the Korean Chemical Society, 31(12): 3782~3784     

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    1. 1987 "우리나라 소아 설사에 있어서의 Enteroadherent Escherichia coli의 병원적 역학" 대한미생물학회지 = The journal of the Korean Society for Microbiology 22 (2): 139~145    
    2. 1995 "이질아메바에 의한 인체 대장상피세포주 HT-29에서의 interleukin-8 유전자의 발현" The Korean journal of parasitology 33 (4): 357~364    
    3. 1998 "Purification and Characterization of Aspartase from Hafnia alvei" Journal of biochemistry and molecular biology = 한국생화학회지 31 (4): 345~349    
    4. 1999 "침습성 세균 감염에 의한 사람 장상피세포에서의 Cyclooxygenase-2 발현 및 이의 발현이 상피세포 Apoptosis에 미치는 영향" The journal of the Korean Society for Microbiology 34 (5): 479~489    
    5. 2000 "Basolateral Secretion of CXC Chemokines by Human Intestinal Epithelial Cells in Response to Bacteroides fragilis Enterotoxin Via NF-${\kappa}B$ Pathway" The journal of the Korean Society for Microbiology 35 (5): 350~350    
    6. 2000 "Bacteroides fragilis와 대장균의 혼합 감염에 의한 복강 조직의 Proinflammatory Cytokine 유전자 발현 조절" The journal of the Korean Society for Microbiology 35 (1): 41~48    
    7. 2001 "사이토카인 유전자 함유 바이러스 유사입자의 제조" 藥劑學會誌 = Journal of Korean pharmaceutical sciences 31 (3): 185~190    
    8. 2001 "Bacteroides fragilis 장독소에 의한 인체 장상피세포에서의 Nuclear Factor-kappa B의 활성화 및 이를 통한 염증 매개 경로의 규명" Journal of bacteriology and virology : JBV 31 (4): 343~351    
    9. 2002 "플라스미드 유전자 함유 혈구 세포 입자의 제조" 藥劑學會誌 = Journal of Korean pharmaceutical sciences 32 (3): 181~184    
    10. 2002 "Role of cytoskeleton in Host Cell Invasion by Intracellular Protozoa Toxoplasma gondii" Journal of microbiology and biotechnology 12 (4): 628~634    
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