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Molecules and cells v.18 no.3, 2004년, pp.369 - 373  
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Activity staining of glutathione peroxidase after two-dimensional gel electrophoresis.

Kho, Chang Won   Park, Sung Goo   Lee, Do Hee   Cho, Sayeon   Oh, Goo Taeg   Kang, Seongman   Park, Byoung Chul  
  • 초록

    We have developed a method for rapid activity staining of proteins with glutathione peroxidase (GPx) activity after 2-D gel electrophoresis. After separating proteins extracted from yeast, or mouse red blood cells, by two-dimensional gel electrophoresis, SDS was removed and the gel was submerged in a Tris-HCl buffer containing glutathione and hydrogen peroxide, followed by incubation with 3-(4,5-dimethylthiazol-2-yl)-2,5-diphenyltetrazolium bromide (MTT) and phenazine methosulfate (PMS). After this proteins with GPx activity appeared as clear zones on a purple background. This relatively simple activity staining method could be useful for rapid screening of proteins with GPx activity in cell extracts.


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