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식물조직배양학회지 = Korean journal of plant tissue culture 9건

  1. [국내논문]   바위솔의 줄기조직으로부터 식물체 재분화   피인용횟수: 1

    최상욱 (경상대학교 농과대학 농화학과 ) , 남상해 (경상대학교 농과대학 농화학과 ) , 양기종 (경상대학교 농과대학 농화학과 ) , 조무제 (경상대학교 식물분자생물학 및 유전자조작연구소(SRC) 경상대학교 자연과학대학 생화학과 ) , 양민석 (경상대학교 식물분자생물학 및 유전자조작연구소(SRC) 경상대학교 자연과학대학 생화학과)
    식물조직배양학회지 = Korean journal of plant tissue culture v.21 no.2 ,pp. 65 - 68 , 1994 , 1015-5880 ,

    초록

    한방에서 항암제로 사용되고 있는 약용식물들로부터 이 차대사산물을 생산하기 위한 시도로서 바위솔의 조직배양을 시도하였다. 바위솔의 부위별 조직, 즉 잎, 줄기 및 화주 조직을 이용하여 캘러스 유기를 시도하였다. 줄기조직과 화주조직에서는 캘러스가 유기되었으나 잎 조직으로부터는 캘러스가 유기되지 많았다. 따라서 캘러스 유기가 가장 왕성하게 일어나는 줄기조직으로부터 유기된 캘러스를 이용하여 식물체 재분화를 시도하였다. 캘러스 유기에는 MS배지에 4 mg/L 2,4-D와 2 mg/L BAP를 첨가하였을 때 가장 효과적이었으며, 잎 조직으로부터는 캘러스형성이 되지 않았다. 식물체 재분화에 있어서 줄기분화는 MS배지 0.5 mg/L와 BAP 2 mg/L를 첨가한 배지에서 가장 높은 분화율을 나타내었으며, 뿌리형성은 2,4-D 1 mg/L와 kinetin 1∼3 mg/L를 첨가한 배지에서만 5%의 분화율을 나타내었다. 뿌리형성에 대한 2,4-D의 적정 농도에 대한 연구 및 뿌리 발생시 생성되는 적색물질의 규명에 대한 연구가 진행되어야 할 것이다. 완전한 식물체로 재분화가 일어나는데는 약 14 주의 기간이 소요되었다.

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    Fig. 1 이미지
  2. [국내논문]   꽃기린 (Euphorbia splendens Bojer) 배양세포로부터 화청소의 대량생산 및 동정   피인용횟수: 2

    선정훈 (태평양 중앙연구소 ) , 정재동 (경북대학교 농과대학 원예학과)
    식물조직배양학회지 = Korean journal of plant tissue culture v.21 no.2 ,pp. 77 - 84 , 1994 , 1015-5880 ,

    초록

    꽃기린 현탁배양에 의한 화청소의 생산에 미치는 탄소원 의 역할을 규명하고 이들 배양세포를 생물반응기를 이용하여 대량배양을 시도하였으며 생성된 색소의 분리 및 동정을 행하였다. 세포의 생장은 3% sucrose농도에서 양호하였으나 단위세포무게당 색소함량은 sucrose의 농도가 3%에서 9%로 증가함에 따라 증진되었다. sucros는 배양 1일 후부터 glucose와 fructose로 분해되지 시작하며, 고농도로 공급된 sucrose는 배지의 삼투압제로 작용하여 색소의 형성을 촉진하였다. 생물반응기 배양의 경우, 기포발생형 생물반응 기가 세포의 손상을 방지하 양호한 생육상을 나타내어 적합하였고 접종농도를 증가시킴으로서 총 색소의 함량은 감소하였으나 배양기간이 1/2로 단축되었으며 색소의 1일 생산성도 증가되는 효과를 나타내었다. 기포발생형 생물반응기를 이용한 색소생산량은 2.2 mg/L/day를 나타내었다. 한편, 배양세포로부터 생성된 주된 화청소는 cyanidin-3-glucoside로 추정되었다.

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  3. [국내논문]   참나물(Pimpinella barchycarpa)의 체세포 경발생에 의한 식물체 대량증식   피인용횟수: 1

    문흥규 (임목육종연구소 생물공학연구실 ) , 윤양 (임목육종연구소 생물공학연구실 ) , 이석구 (임목육종연구소 생물공학연구실)
    식물조직배양학회지 = Korean journal of plant tissue culture v.21 no.2 ,pp. 85 - 90 , 1994 , 1015-5880 ,

    초록

    기내증식 중인 참나물(Pimpinella brachycarpa)의 엽병을 절편으로하여 체세포배형성을 통한 식물체의 대량증식을 유도하였다. 체세포배 발생은 MS 및 $mB_5$ 기본배지에 BA와 2,4-D, 혹은 BA, 2,4-D 및 NAA를 혼용하여 명배양 하였을때 효과적이었으며, 농도는 BA 0.1 mg/L, 2,4-D 및 NAA는 0.5 mg/L 이었다. 광조건은 식물생창조절 물질의 반응에도 크게 영향을 미쳐, 명배양에서 효과적인 조건이 암배양에서는 전혀 다른 결과를 나타냈다. 즉 MS 및 $mB_5$ 배지에 0.5 mg/L 2,4-D를 각각 첨가하고 명배양한 조건에서는 100%의 체세포배 발생을 보인 반면, 암배양에서는 동일한 배지 조건에서 체세포배가 전혀 형성되지 않았다. 체세포배의 발육단계는 동일한 젤편에서도 많은 차이를 보였으며, 배발생한 캘러스를 $mB_5$ 기본배지 및 0.1 mg/L NAA가 첨가된 배지로 계대배양 하였을때 식물체의 재생에 주효하였다. 이미 형성된 체세포배는 배양기간이 길어지면 캘러스화 되면서 또다른 2차 체세포배가 형성되어 하나의 체세포배로 부터 연속적인 식물체의 재생이 가능하였다. 2,4-D와 NAA의 단독첨가는 캘러스의 형성에는 양호하나 체세포배로부터 식물체의 재생에는 비효과적이었다. NAA를 단독첨가하여 암배양한 절편에서는 2차 계대배양시 절편 표면으로부터 부정근이 형성되었다. 배발생한 캘러스는 BA와 2,4-D가 첨가된 배지에서 약 5주간 간격의 계대배양으로 2년 이상 유지가 가능하였다. 체세포배를 통하여 재생된 식물체는 $mB_5$ 및 MS 기본배지에서 4-6주간 생장시킨 다음, 인공 배양토에서 효과적으로 환경순화 되었다. 이 식물체는 엽병을 절편으로 체세포배 발생을 통한 기내 대량증식이 가능 하다고 사료되었다.

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  4. [국내논문]   고구마(Ipomoea batatase)현탁배양에서 배지조성 및 세포접종량의 적정화에 의한 Pemxidase생산성 향상   피인용횟수: 3

    곽상수 (한국과학기술연구원 유전공학연구소 생물자원연구그룹 ) , 김수경 (한국과학기술연구원 유전공학연구소 생물자원연구그룹 충남대학교 자연과학대학 생화학과 ) , 정경희 (한국과학기술연구원 유전공학연구소 생물자원연구그룹 ) , 유순희 (한국과학기술연구원 유전공학연구소 생물자원연구그룹 ) , 박일현 (충남대학교 자연과학대학 생화학과 ) , 유장렬 (한국과학기술연구원 유전공학연구소 생물자원연구그룹)
    식물조직배양학회지 = Korean journal of plant tissue culture v.21 no.2 ,pp. 91 - 97 , 1994 , 1015-5880 ,

    초록

    고구마 현탁배양세포로부터 POD 고생산세포주로 선발한 SP-47세포주를 사용하여 POD생산성을 향상시키기 위하여 식물생장조절제 및 탄소원의 종류와 농도, 세포접종량 등의 배양조건을 적정화하였다. 30 g/L Surcrose, 1 mg/L 2,4-D가 첨가된 LS배지 50mL을 함유한 30 mL Erlenmeyer flask에 세포생중량 1 g을 접종하여 $25^{\circ}C$ 암소에서 100 rpm으로 진탕배양하였을 때 세포생장은 배양 후 15일에 절정에 달하였으나 단위세포당 POD 활성(unit/g dry cell wt)은 배양 25일에 약 6,800으로 이는 실생 서양겨자무뿌리의 것보다 약 30배 높았다. 배양시기별 단위세포당 단백질 함량은 계대배양후 약간 높았다가 감소한 후, 배양 25일까지는 거의 일정한 값을 유지하다가 계속 배양함에 따라 감소하였으나 POD 비활성(unit/mg protein)은 배양후 12일부터 배양말기 (40일)까지 계속하여 증가하였다. 배양시기별 POD 동위효소의 패턴은 배양시기에 관계없이 거의 일정하였으나 배양 25일이후 산성의 주요 동위효소들의 활성이 약간 증가하였다. 이러한 결과로부터 고구마 세포배양의 POD는 세포생장 및 계대배양과 배지고갈로 인한 배양스트레스와 밀접한 관련 이 있을 것으로 간주된다. 본 연구에서 확립한 SP-47세포주는 하나의 동위효소가 강하게 발현되어 높은 활성을 보임으로써 새로운 POD 대량생산 시스템에 활용될 수 있을 것으로 기대된다.

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  5. [국내논문]   수분ㆍ수정 시기를 이용한 Bialaphos 저항성 형질전환 담배의 개발   피인용횟수: 3

    이효연 (순천대학교 농과대학 ) , 노일섭 (일본 동북대학 농학부 ) , 김진호 (순천대학교 농과대학 ) , 유장렬 (과학기술원 유전공학 연구소 ) , 이종석 (서울여자대학교 자연과학대학 ) , 김학진 (순천대학교 농과대학 )
    식물조직배양학회지 = Korean journal of plant tissue culture v.21 no.2 ,pp. 99 - 103 , 1994 , 1015-5880 ,

    초록

    비선택성 제초제인 bialaphos는 고등식물에 있어서 glutamine 합성을 억제하여 식물체를 고사 시키는 능력을 갖고 있다. 본 연구에서 acetylteansferase에 의해 encoding된 bialaphos 저항성 유전자(bar gene)는 세균(Pseudomonas sryngae pv tabaci)의 genomic DNA로부터 cloning된 것을 사용하였다. 수분시킨 담배의 화계에 일정한 시간별로 bar 유전자를 처리한 결과 수분 후 30-40시간 사이의 처리구 에서 형질전환 식물체가 가장 많이 얻어 졌다. 그러한 형질전환 식물체의 kanamycin과 bialaphos 저항성 형질은 자식후대(T $_1$ , T $_2$ )에 있어서도 우성형질로 유전되었으나 wild type의 담배는 상기의 약제를 처리 하였을때 전부 고사하였다. 그리고, T $_1$ 세대의 형질전환 식물체로부터 전 염색체 DNA를 추출하여 Southern 분석한 결과 bar 유전자가 식물의 염색체상에 안정하게 존재하는 것을 확인하였다. 이상의 결과로부터 담배의 수분, 수정 시기에 외부유전자인 bar를 화주에 처리함으로써 bialaphos 저항성 식물을 만들어낼 수 있었다.

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  6. [국내논문]   Polyamine 합성 저해제와 Polyamine이 대두 자엽 부정근의 형성에 미치는 영향   피인용횟수: 2

    한태진 (한림대학교 자연과학대학 생물학과 ) , 이동원 (한림대학교 자연과학대학 생물학과 ) , 이순희 (연세대학교 이과대학 생물학과)
    식물조직배양학회지 = Korean journal of plant tissue culture v.21 no.2 ,pp. 105 - 110 , 1994 , 1015-5880 ,

    초록

    olyamine 합성 저해제와 polyamine이 부정근 형성에 미치는 영향을 알아보고자 대두 자엽 절편을 이용하여 5 $\times$ $10^{-6}$ M NAA와 5 $\times$ $10^{-7}$ M kinetin으로 조성한 부정근 형성 배지에 polyamine 합성 저해제와 Polyamine을 처리하여 Polymine 저해제에 의한 부정근 형성 억제와 부정근 형성능회복을 조사하였다. 부정근 형성 배지에 $\alpha$ -difluoromethylornithine (DFMO), $\alpha$ -difluorornethyla.ginine (DFMA), cyclohexyl ammonium sulfate(CHA), dicyclohexylamine(DCHA) 및 methylglyoxal-bis (guanylhydrazone) (MGBG)등의 polyamine 합성 저해제를 $10^{-4}$ - $10^{-2}$ M농도로 단용 또는 혼용 처리한 결과 $10^{-3}$ M MGBG에서 부정근 형성이 가장 억제되었으며 $10^{-3}$ M MGBG에 각 Polyamine을 처리한 결과 spermine $10^{-5}$ M을 동시 처리시 부정근 형성능이 다소 회복되었다. Polyamine 함량은 대조구에 비하여 각 실험구에서 배양 초기에 급격히 증가하였으며 spermine 동시 처리구에서 각 polyamine 함량의 증가가 가장 현저하였다.

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    Fig. 1 이미지
  7. [국내논문]   벼 (Oryza sativa L.)배양세포의 고중력유도성 cDNA의 탐색  

    권순태 (안동대학교 자연과학대학 ) , 김길웅 (경북대학교 농과대학 농학과 )
    식물조직배양학회지 = Korean journal of plant tissue culture v.21 no.2 ,pp. 111 - 115 , 1994 , 1015-5880 ,

    초록

    벼(Oryza sativa L. cv Nipponbaie)배양세포에 중력 450,000 x g를 처리하여 cDNA library를 만들고, 무처리 및 고중력을 처리한 cDNA 프로브로 스크리닝을 실시하여 고중력에 특이적으로 양성반응을 나타내는 GSC 13 및 GSC124 cDNA를 선발하였다. 선발된 두 유전자 GSC 13 및 GSC 124의 길이는 각각 1.34 및 0.67 kilobase pairs였으며, 배양세포내에서 관련된 transcript의 크기는 각각 2.0 및 1.9 kilobase pairs인 것으로 나타났다. 두 유전자를 프로브로한 Northern hybridization을 실시한 결과 GSC 13, GSC 124 공히 배양세포내에 고중력처리에 의해 특이적으로 축적되는 mRNA가 나타났으며, 중력강도 300,000 x g 에 비해 450,000 x g 처리에서 더욱 강한 축적을 보였고 450,000 x g 4시간 처리에서 최대의 수준을 보였다.

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  8. [국내논문]   건조, 염분 및 탕의 처리가 쇠비름(Portulaca oleracea L.) 배양세포의 재분화에 미치는 영향  

    권순태 (안동대학교 자연과학대학 ) , 오세명 (안동대학교 자연과학대학)
    식물조직배양학회지 = Korean journal of plant tissue culture v.21 no.2 ,pp. 117 - 121 , 1994 , 1015-5880 ,

    초록

    쇠비름(portuaaca oleracea L.)의 줄기절편체로부터 캘러스유도를 위한 적정배지는 BAP 0.1 + 2,4-D 1.0 mg/L., 30g/L sucrose 및 10 g/L agar를 첨가한 MS배지로 나타났으며, 액체배양에 의한 세포의 증식에는 BAP 0.1 + 2,4-D 0.5mg/L가 함유된 MS배지가 효과적이었다. 장시간 건조처리는 세포는 활력과 재생 및 재분화율이 강하게 억제되나, 1시간 및 2시간동안의 단시간 건조처리한 세포의 재분화율은 각각 83및 80%로 나타나나 무처리 61%에 비해 높았다. 0.6% NaCl의 2일간 전처리는 세포의 재분화율에는 영향을 미치지 않으나, 세포활력 및 재생률에는 억제작용을 나타내었다. Sucrose 70및 100 g/L를 전처리한 쇠비름세포의 재분화율은 각각 80및 81%로 무처리에 비해 높았다.

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    Fig. 1 이미지
  9. [국내논문]   대두 (Glycine max L.)의 자엽 부정근 형성시 특이단백질의 변화 양상   피인용횟수: 1

    한태진 (한림대학교 자연과학대학 생물학과)
    식물조직배양학회지 = Korean journal of plant tissue culture v.21 no.2 ,pp. 123 - 129 , 1994 , 1015-5880 ,

    초록

    대두(Glycine max L) 자엽의 발아 정도에 따른 부정근 형성능과 자엽 절편의 부정근 형성 배지 처리 시간에 따른 부정근 형성 정도를 조사하였으며 부정근 형성과 관계 있는 발아 및 부정근 유기시의 단백질 변화 양상을 2차원 전기영동법으로 조사하였다. 발아된 자엽의 부정근 형성능은 발아 4일 이후에 높았으며 부정근 형성 배지에서의 부정근 형성은 처리 4일 이후부터 형성되어 6일 이상 처리한 것이 가장 부정근 형성이 높았다. 또한 부정근 형성과 관계 있는 단백질 34개의 단백질 spot를 얻었는데 부정근 형성을 위한 발아 자엽의 주요 단백질은 염기성 단백질 27d이었다. 그리고 부정근 유기시 생성되는 단백질은 염기성의 길 kD, 23 kD 및 33 kD였으며 산성의 27 kD와 29 kD이었다.

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