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한국농화학회지 = Journal of the Korean society of Agricul... 26건

  1. [국내논문]   ${\gamma}-Cyclodextrin$ Glycosyltransferase 생산균주의 분리, 동정 및 효소 생산조건  

    김명희 (충남대학교 식품영양학과 ) , 임영희 (대전대학교 식품영양학과 ) , 배경숙 (생명공학연구소 ) , 오태광 (생명공학연구소 ) , 손천배 (충남대학교 식품영양학과)
    한국농화학회지 = Journal of the Korean society of Agricultural Chemistry and Biotechnology v.40 no.6 ,pp. 459 - 464 , 1997 , 0368-2897 ,

    초록

    Cyclodextrin glycosyltransferase 생산균주를 토양으로부터 분리하여 형태학적, 생화학적 그리고 균주의 세포벽 지방산 조성분석에 의해 Bacillus brevis로 동정하였고, Bacillus brevis CD162로 명명하였다. 또한 배지조성에 따른 cyclodextrin glycosyltransferase의 최적생산조건을 검토한 결과, 2.0% soluble starch, 0.75% yeast extract, 0.5% bacto peptone, 0.2% $K_2HPO_4$ , 0.05% $MgSO_4{\cdot}7H_2O$ , 1.5% $Na_2CO_3$ (pH 10.2)의 배지 조건에서 $30^{\circ}C$ 에서 96시간 배양하였을 때 가장 높은 효소생산인 0.9 unit/ml을 얻을 수 있었다.

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  2. [국내논문]   Bacillus brevis CD162 Cyclodextrin Glycosyltransferase의 정제 및 특성  

    김명희 (충남대학교 식품영양학과 ) , 임영희 (대전대학교 식품영양학과 ) , 오태광 (생명공학연구소 ) , 손천배 (충남대학교 식품영양학과)
    한국농화학회지 = Journal of the Korean society of Agricultural Chemistry and Biotechnology v.40 no.6 ,pp. 465 - 471 , 1997 , 0368-2897 ,

    초록

    Bacillus brevis CD162가 생산하는 cyclodextrin glycosyltransferase (CGTase)를 ammonium sulfate 침전, DEAE-Sephadex CL-6B 및 Sephadex G-150 컬럼 크로마토그래피를 수행하여 분리정제하였다. 정제된 CGTase는 분자량이 약 74,000, 등전점은 약 6.3인 단백질이었고, 정제된 단백질을 SDS-PAGE한 후 변성된 단백질을 재활성시켜 zymogram을 수행한 결과 cyclodextrin glycosyltransferase임을 확인할 수 있었다. 이 효소의 최적활성 pH와 온도는 각각 8.0과 $55^{\circ}C$ 이었으며, pH $5.5{\sim}9.0$ 과 $50^{\circ}C$ 까지 안정한 활성을 보였다. 또한, CGTase의 $NH_2$ -말단 부위의 아미노산서열은 Ser-Val-Thr-Asn-Lys-Val-Asn-Tyr-Ser-Lys-Asp-Val-Ile-Tyr-Gln 이었으며, 전분으로부터 cyclodextrin으로의 전환률을 분석한 결과, ${\alpha}$ -cyclodextrin은 1.3%, ${\beta}$ -cyclodextrin은 33.9% ${\gamma}$ -cyclodextrin은 9.7% 이었다.

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  3. [국내논문]   열처리가 결명자의 화학성분 변화 및 추출물의 균체증식에 미치는 영향  

    윤종범 (건국대학교 식품공학과 ) , 김경구 (건국대학교 식품공학과 ) , 사동민 (선문대학교 식량자원학부 ) , 이영택 (경원대학교 식품생물공학과 ) , 주현규 (선문대학교 식량자원학부)
    한국농화학회지 = Journal of the Korean society of Agricultural Chemistry and Biotechnology v.40 no.6 ,pp. 472 - 477 , 1997 , 0368-2897 ,

    초록

    열처리가 결명자의 색상, 일반성분 및 향기성분 변화에 미치는 영향을 알아보고 결명자 물추출물의 효모 및 고초균 증식과 알코올 발효에 미치는 효과를 조사하였다. 결명자의 일반성분 변화는 볶음온도가 증가함에 따라 수분, 단백질, 지방은 감소한 반면 섬유소 및 회분은 증가하였다. 결명자의 색상 변화는 볶음온도가 높을수록 명도(L), 적색도(a), 황색도(b)의 값은 감소하였고 총색도 $({\Delta}E)$ 의 값은 큰 차이가 없었다. 생결명자와 $160^{\circ}C$ 로 열처리한 결명자의 주요 향기성분의 비교에서는 크게 차이를 보이지 않았고, 커피의 주요 성분인 furfuryl alcohol을 결명자에서도 분리, 확인하였다. 볶음온도를 달리한 결명자의 물추출물을 첨가한 각 시험구의 효모증식 효과에서는 첨가량이 증가함에 따라서 효모의 증식도가 증가하였으며 $160^{\circ}C$ 에서 볶음처리한 물추출물에서 제일 활성이 높았다. $160^{\circ}C$ 로 열처리한 물추출물의 첨가량이 증가함에 따라서 S. cerevisiae의 증식이 24시간까지 급격히 증가하였으며, 대조구보다 모두 증식이 높았다. 결명자 추출물이 고초균의 성장 및 ${\alpha}-amylase$ 생성에 미치는 영향을 조사한 결과 0.5% 처리구에서 가장 높은 생육이 나타났고, ${\alpha}-amylase$ 효소생산 정도는 각 처리구간에 별 차이가 없었다. 각 시험구의 알코올 발효과정중 알코올 함량은 볶음온도가 높아짐에 따라 증가되었다.

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  4. [국내논문]   글루타치온의 효소적 생합성에 관계되는 E.coli ${\gamma}-Glutamylcysteine$ Synthetase의 특성 연구  

    남용석 (고려대학교 법의학교실 ) , 곽준혁 (고려대학교 생명공학원 ) , 이세영 (고려대학교 생명공학원)
    한국농화학회지 = Journal of the Korean society of Agricultural Chemistry and Biotechnology v.40 no.6 ,pp. 478 - 483 , 1997 , 0368-2897 ,

    초록

    E. coli K-12 균주에서 ${\gamma}-Glutamylcysteine$ synthetase를 정제하고 효소적 방법에 의한 글루타치온 합성에 관련된 특성을 검사하였다. 정제한 효소의 활성은 L-glutamate의 농도가 60 mM 까지 증가와 더불어 증가하였으나, 60 mM L-cysteine 에서는 50% 그리고 45 mM glycine 에서는 40%의 효소활성이 감소되었다. 효소의 활성은 반응산물 중의 하나인 ADP 뿐만 아니라 환원형 글루타치온에 의해서 감소되었다. 그러므로 환원형 글루타치온 뿐만 아니라 glutathione synthetase의 기질인 glycine은 ${\gamma}-glutamylcysteine$ synthetase 활성을 저해하므로 글루타치온 생산을 위해서는 ${\gamma}-glutamylcysteine$ synthetase 반응과 glutathione synthetase의 두 분리된 반응으로 이루어진 생반응계를 고안하는 것이 바람직하다. 또한 글루타치온 합성반응으로 부터 생성되는 ADP는 ${\gamma}-glutamylcysteine$ synthetase의 활성을 감소시키므로 글루타치온 합성을 위해서 ATP 재생계의 도입이 필요하다.

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  5. [국내논문]   산분해 대두 단백질로부터 분리된 Esterase 생성균의 생육 및 효소생성 특성  

    오남순 (공주대학교 산업과학대학 식품공학과)
    한국농화학회지 = Journal of the Korean society of Agricultural Chemistry and Biotechnology v.40 no.6 ,pp. 484 - 489 , 1997 , 0368-2897 ,

    초록

    산분해 대두 단백질로 부터 식품 보존료인 p-hydroxybenzoic acid butyl ester를 분해하고, esterase 활성을 갖는 균주들을 분리, 동정하여 그들의 생육 및 효소 생성 특징을 조사하였다. 분리된 균주들은 전부 Baillus sp. 로 동정되었으며, specific growth rate는 균주에 따라 $0.844{\sim}1.213\;h^{-1}$ 였으며, esterase activity 는 Baillus sp. KB8 균주가 222 mU/ml로 대비균주인 B. subtilis ATCC6633의 21 mU/ml보다 10배 높은 활성을 보였으나 p-hydroxybenzoic acid butyl ester 분해 활성도는 $5.4{\sim}8.1\;mU/ml$ 로 균주에 따른 큰 차이는 볼 수 없었다. Baillus sp. KB8 균주의 배양시 NaCl 첨가는 생육을 저해시키며, esterase의 세포외 축적과 세포내 합성을 억제시키는 것으로 나타났으며, 특히 NaCl 첨가 농도의 증가는 세포외 축적을 더 억제시키는 것으로 나타났다. 플라스크 배양실험 결과 Baillus sp. KB8 균주의 효소 생성은 생육이 stationary phase 이후 점차 증가하여 배양 64시간에 420 mU/ml를 생성하였다. 온도에 대한 esterase의 활성은 $50^{\circ}C$ 에서 30분간 실활없이 유지되었으나 $70^{\circ}C$ 에서는 전부 실활되었다. $60^{\circ}C$ 와 $65^{\circ}C$ 에서의 효소 활성은 노출 시간에 따라 지수적인 실활 경향을 보여 3시간 후 $60^{\circ}C$ 에서 76%, $65^{\circ}C$ 에서는 3%의 잔존 효소활성을 보였다.

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  6. [국내논문]   Benzo[a]pyrene으로 유발한 Mouse Forestomach Tumor 생성에 대한 Astaxanthin 함유 난황의 효과  

    이상호 (해태제과 중앙연구소 ) , 박철우 (경상대학교 농화학과 ) , 박원석 (경상대학교 농화학과 ) , 이영춘 (중앙대학교 식품공학과 ) , 최의성 (생명공학연구소 응용미생물연구부 ) , 하영래 (경상대학교 농화학과)
    한국농화학회지 = Journal of the Korean society of Agricultural Chemistry and Biotechnology v.40 no.6 ,pp. 490 - 494 , 1997 , 0368-2897 ,

    초록

    Benzo[a]pyrene (BP)으로 유발한 mouse의 전위암 형성에 대한 astaxanthin 함유 난황 (astaxanthin-containing egg yolk : AEY)의 영향을 연구하였다. Female ICR mouse (6-7 주령, 5 mice/cage, 20 mice/treatment)에게 물과 사료를 자유로이 공급하면서 일주일간 적응시킨 후 다음과 같이 처리를 하였다. BP (2 mg/0.2 ml corn oil)를 각 mouse에 경구투여하기 4 일과 2 일 전에 50 mg AEY, 100 mg AEY, 150 mg AEY, 또는 150 mg control egg yolk (CEY)을 함유하는 phosphate-buffered saline (PBS) 0.2 ml를 경구투여하였다. Control mouse는 0.2 ml PBS와 BP 만 경구투여하였다. 이 과정을 4회 반복하였다. BP를 경구투여 한 일주일 후부터 몸무게와 사료섭취량을 매주 기록하였으며 24주 후에 생존한 모든 mouse에 대해 전위암 생성을 조사하였다. AEY를 처리한 mouse에서는 control mouse나 CEY 처리 mouse에 비해 mouse 당 암의 수가 1/3 정도로 감소되었다. 이와 같은 AEY의 항암효과는 AEY의 처리량에 비례하였다. AEY 처리에 따른 암발생율은 control이나 CEY 처리에 비해 감소되었으나 150 mg AEY 처리에서만 유의성이 있는 감소를 보였다. AEY 처리에 따른 몸무게나 사료 소비량의 감소현상은 볼 수 없었다. 따라서 이 결과는 AEY가 BP로 유발한 mouse의 전위암 발생을 억제함을 암시한다.

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  7. [국내논문]   Bacillus sp. E1 의 cyclodextrin 생산효소 유전자 분리 및 구명  

    용정식 (서울대학교 농업생물신소재 연구센터,농화학과 ) , 최진남 (서울대학교 농업생물신소재 연구센터,농화학과 ) , 박성순 (서울대학교 농업생물신소재 연구센터,농화학과 ) , 박천석 (서울대학교 농업생물신소재 연구센터,식품공학과 ) , 박관화 (서울대학교 농업생물신소재 연구센터,식품공학과 ) , 최양도 (서울대학교 농업생물신소재 연구센터,농화학과)
    한국농화학회지 = Journal of the Korean society of Agricultural Chemistry and Biotechnology v.40 no.6 ,pp. 495 - 500 , 1997 , 0368-2897 ,

    초록

    Cyclodextrin을 합성하는 효소 CGTase를 호염기성 Bacillus sp. E1으로부터 분리하기 위하여 PCR을 실시하였다. PCR을 위하여 합성한 primer의 염기서열은 현재까지 보고된 CGTase 유전자의 염기서열을 비교 분석하여 가장 높게 보존된 영역을 찾아내어 선택하였다. PCR 증폭 결과 1.2 kbp 크기의 DNA 절편을 얻을 수 있었고 이를 molecular probe로 이용하여 Southern blot 분석을 실시하였다. Southern blot 분석결과 CGTase 유전자는 염색체 DNA를 제한효소 XbaI으로 절단한 5.3 kbp 절편내에 존재한다는 사실을 알아내었다. CGTase 유전자를 분리하기 위하여 유전자 은행을 제조한 후 선별작업을 실시하여 genomic clone인 pCGTE1을 얻을 수 있었다. pCGTEl의 염기서열을 결정한 결과 분리한 CGTase 유전자는 2109 bp의 open reading frame을 가지며 이는 703개의 아미노산으로 구성된 단백질을 coding하는 것으로 나타났다. 아미노산 서열의 유사성을 비교한 결과 Bacillus sp. KC201의 CGTase 와 가장 높은 94.3% 동질성을 나타내었다.

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  8. [국내논문]   Stevia rebaudiana Bertoni의 Steviol 생합성 효소 ent-Kaurenoic Acid 13-Hydroxylase의 특성  

    김근기 (경상대학교 농과대학 농화학과)
    한국농화학회지 = Journal of the Korean society of Agricultural Chemistry and Biotechnology v.40 no.6 ,pp. 501 - 507 , 1997 , 0368-2897 ,

    초록

    파라과이 원산의 국화과 식물 Stevia rebaudiana Bertoni는 steviol (ent-13-hydroxy kaur-16-en-19-oic acid)을 기본 골격으로 하는 stevia 감미료를 건물 중량의 5-10%를 생합성하여 축적을 한다. 감미성분은 Gibberellin 생합성의 전구체로 알려진 ent-kaurenoic acid (ent-kaur-16-en-19-oic acid; ent-KA)의 7번과 13번의 어느 탄소에 hydroxylation을 시키느냐에 따라 gibberellin 대사와 steviol 대사로 나뉘어진다. ent-KA 13-hydroxylase를 stevia 엽록체의 stroma에 존재하는 것을 확인했다. Stroma 분획 단백질 $100\;{\mu}g$ 으로 효소 반응의 cofactor 요구성을 조사해 본 결과, 반응 혼합액에 NADPH를 첨가하지 않았을 때는 85%의 효소활성의 감소를 보였고, NADPH 대신 NADH를 첨가해도 34%의 감소를 보였다. anaerobic 조건에서는 2.1%의 활성을 뛰었다. 이 결과로 ent-KA 13-hydroxylase는 NADPH와 $O_2$ 요구성임을 밝혔다. FAD, FMN, riboflavin을 첨가함으로써 FAD는 1.5배, riboflavin은 1.7배의 효소활성 증가 효과가 나타났다. 효소의 기질 특이성을 조사한 결과, t-cinnamic acid, 4-hydroxyphenyl acetic acid, choline과 resorcinol에는 전혀 활성이 검출되지 않았으며, $[^(14)C]-methyl-KA$ 를 ent-KA 대신에 기질로 사용했을 때는 16.7% 의 활성이 검출되어 ent-KA 13-hydroxylase는 기질특이성이 높은것으로 확인되었다.

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  9. [국내논문]   수분-열처리와 노화에 의해 고아밀로오스 옥수수전분으로부터 형성된 효소저항전분의 특성비교  

    권미라 (나비스코(주) 연구소 ) , 신말식 (전남대학교 식품영양학과)
    한국농화학회지 = Journal of the Korean society of Agricultural Chemistry and Biotechnology v.40 no.6 ,pp. 508 - 513 , 1997 , 0368-2897 ,

    초록

    고아밀로오스 옥수수전분인 Hylon V와 Hylon VII을 사용하여 수분-열처리 및 노화하고 효소저항 전분을 분리하여 열적 특성 및 입자 형태를 각각 DSC와 현미경으로 조사하였다. 처리 후 효소저항 전분의 수율은 두 전분이 비슷한 경향으로 증가하였으나 아밀로오스 함량이 높은 Hylon VII이 Hylon V보다 더 높았다. 특히 수분-열처리에 의해 효소저항성이 크게 증가되어 생전분과 수분-열처리 전분의 효소저항 전분 수율은 Hylon V의 경우는 11.4%에서 26.6%로, Hylon VII의 경우는 15.9%에서 32.8%로 증가하였으나 노화전분은 생전분보다 약간 증가하였다. DSC에 의하면 수분-열처리로 호화온도가 증가되고 엔탈피가 감소하나, 노화된 전분은 $140^{\circ}C$ 근처에서 피크를 보였다. 생전분과 수분-열처리 전분에서 분리한 효소저항 전분은 폭넓은 곡선을 나타낸 반면, 노화전분에서 분리한 효소저항 전분은 $150^{\circ}C$ 근처에서 날카로운 피크를 나타냈다. 수분-열처리에 의해 전분 입자의 형태나 복굴절은 그대로 유지되었으나 노화전분은 호화 중에 용출된 아밀로오스에 의해 입자들이 서로 엉켜 있었다. 수분-열처리 전분에서 분리된 효소저항 전분은 요드 염색으로 남색을 보여 생전분이나 노화전분에서 분리된 효소저항 전분보다 효소저항성이 큼을 알 수 있었다.

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  10. [국내논문]   마늘과 생강의 항균성 및 증류성분   피인용횟수: 6

    지원대 (영남대학교 식품가공학과 ) , 정민선 (영남대학교 식품가공학과 ) , 정현채 (영남대학교 식품가공학과 ) , 이숙정 (영남대학교 환경보건학과 ) , 정영건 (영남대학교 식품가공학과)
    한국농화학회지 = Journal of the Korean society of Agricultural Chemistry and Biotechnology v.40 no.6 ,pp. 514 - 518 , 1997 , 0368-2897 ,

    초록

    향신료 중에서 항균성 물질을 분리 정제하고, 그 저해 양상 및 작용 기구를 규명하고자 하는 연구의 일환으로 대표적인 향신료인 마늘과 생강을 대상으로 하여 각종 용매로 추출한 추출물의 항균성을 확인하는 한편, 이들의 증류 성분을 추출, 분리, 동정하였다. 마늘의 각종 추출물은 대체로 Gram 양성균보다는 Gram 음성균에 강한 항균성을 나타내었고, 효모에 대해서도 매우 강한 항균성을 보였는데, 추출에 사용된 용매 중에는 에테르를 사용한 추출물에서 비교적 강한 항균성을 나타내었다. 생강의 경우도 항균성 물질은 에테르를 용매로 사용할 때 세균에 대한 항균 효과를 기대할 수 있었다. 마늘과 생강의 증류 성분을 SDE장치를 사용하여 추출하고, 이를 GC/MSD와 Kovat's retention index로 분석한 결과, 각각 13종과 21종이 동정되었다. 마늘에는 함황화합물이 가장 많은 종을 차지하였고, 생강에는 탄수화물이 가장 많은 종을 차지하였다. 마늘의 특징적 방향에 기여하는 성분으로는 di-2-propenyl disulfide, methyl 2-propenyl disulfide, 2-vinyl-4H-1,3-dithiirane 및 3,3'-thiobis-1-propene이었고, 생강의 특징적 방향에 기여하는 성분으로는 ${\alpha}-zingibirene$ , ${\beta}-phellandrene$ , ${\beta}-sesquiphellandrene$ 및 camphene이었다.

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