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미생물을 이용한 항생제 및 합성항균제 간이 시험법 개선 연구
Microbial screening test for the detection of antimicrobial residues

  • 사업명

    식품등안전관리

  • 과제명

    미생물을 이용한 항생제 및 합성항균제 간이 시험법 개선 연구

  • 주관연구기관

    경희대학교
    Kyung Hee University

  • 연구책임자

    김해영

  • 참여연구자

    김태운   박민희   박희진  

  • 보고서유형

    최종보고서

  • 발행국가

    대한민국

  • 언어

    한국어

  • 발행년월

    2008-12

  • 과제시작년도

    2008

  • 주관부처

    식품의약품안전청

  • 사업 관리 기관

    식품의약품안전청
    Korea Food & Drug Administration

  • 등록번호

    TRKO201000000354

  • 과제고유번호

    1475003883

  • 키워드

    동물용의약품.항생제.미생물 간이시험법.veterinary drug.antibiotics.microbial screening test.

  • DB 구축일자

    2013-04-18

  • 초록 


    For the screening of residual antibiotics in foods, bioassays, microbiological inhibitor tests are commonly applied. These method...

    For the screening of residual antibiotics in foods, bioassays, microbiological inhibitor tests are commonly applied. These methods are based on the various susceptibility of bacteria to different antibiotics. However, the sensitivity of bioassay in Food Code is generally insufficient to detect some residual antibiotics at level of interest. This study was performed to investigate the detection limit of variable antibiotics of the bioassay in Food Code and to improve the sensitivity to some antibiotics. The sensitivity of bioassay in Food Code using Bacillus megaterium ATCC 9885, B. subtilis ATCC 6633, B. cereus ATCC 11778 and Geobacillus stearothermophilus ATCC 10149 was low in the detection of macrolides quinolones and aminoglycosides. On the contrary, Micrococcus luteus (Kocuria rhizophila) ATCC 9341 showed high sensitivity to macrolides and Escherichia coli ATCC 11303 was highly sensitive to quinolones and aminoglycosides. Consequently, both strains would be useful to improve sensitivity of bioassay in Food Code with a wide detection range. Also, the effectiveness of different kinds of sample preparation methods, such as sample (tissue) direct method, extraction method using buffer solution, disk insertion method and squeeze method using presser, were compared to detect antibiotic residues effectively. In order to validate sensitivity, samples spiked with the antibiotics at the levels of interest were used. Sample direct method was simple, but inhibition zone was ambiguous due to aqueous extract drained from tissues. Extraction method based on sample dispense to appropriate buffer was labor intensive and sensitivity was low compared to the other methods. In contrast to two methods mentioned above, disk insertion method and squeeze method were simple and showed high sensitivity to antibiotics inoculated.


    위생검사기관 뿐만 아니라 산업체에도 많이 이용되고 있는 식품 중 잔류 항생제의 신속 검사를 위한 현행 식품공전의 항생제 간이시험법은 4가지 미생물(B. cereus ATCC11778, B. stearothermophilus ATC...

    위생검사기관 뿐만 아니라 산업체에도 많이 이용되고 있는 식품 중 잔류 항생제의 신속 검사를 위한 현행 식품공전의 항생제 간이시험법은 4가지 미생물(B. cereus ATCC11778, B. stearothermophilus ATCC 10149, B. megaterium ATCC 9885, B. subtiIis ATCC 6633)을 이용하는 시험법으로 polyether, Peptides 등 일부 항생제에는 감도가 좋지 않은 단점을 가지고 있다. 그러므로 현행 검사 방법을 개선한 감도와 정확성이 높은 미생물 간이 시험법의 개발이 필요하다. 본 과제에서는 현재 사용되고 있는 식품 공전의 간이 시험법을 그대로 수행하여 각 계열의 항생제들에 대한 정확한 정량 한계를 제시하고 일부 항생제의 낮은 검출 감도를 보완할만한 새로운 미생물을 이용한 간이 검사법을 개발하고자 하였다. 개선된 방법으로 quinolone계 항생 물질에 대한 감도가 좋은 Escherichia coli ATCC 11303와 EEC 4-p1ate에서 사용된 균주로 penicillin계 및 macrolide계에 높은 검출감도를 나타내는 Micrococcus luteus ATCC 9341의 두 가지 균주를 추가하여 실험을 수행하였다. 그리고 기존의 식품 공전 상에 제시된 항생제 계열은 총 9가지 계열로 현재 식품에 사용되고 있는 항생제 계열을 검출하기에는 부족하기에 quinolones계열과 cephalosporins계열의 항생제들을 추가하여 검출영역을 확대시켰다. 또한 식품에 잔류하는 항생제를 효율적으로 검출하기 위해서 축산물, 수산물, 알류 등에 적용 가능한 시험 조작법에 대해서도 검토하였다. 소고기, 돼지고기, 광어 그리고 계란에 항생제를 농도별로 직접 적용시켜 각 시험 조작법에 대한 회수율을 알아보고 각 샘플들에 있어서 가장 적합한 시험 조작법을 검토하였다. 그 결과 식품 공전에 제시되어 있는 직접법, 추출 용액을 이용한 추출법보다 소고기, 돼지고기, 광어 등 육질이 있는 식육의 경우에는 육즙을 짜내는 짜내기 방법이 효과적이었고, 유동성이 있는 알류인 계란의 경우에는 흰자와 노른자를 섞은 전란액에 디스크를 침지시키는 방법이 가장 좋은 감도를 나타내었다. 감도와 검출 범위가 보완된 간이시험법 개발로 다량의 시료에 대한 항생제 및 합성항균제의 신속한 스크리닝이 가능해져서, 보다 정확한 항생제 검출로 인해 식품 중 잔류 항생제 안전 관리 강화가 가능해 질 것으로 사려되었다.


  • 목차(Contents) 

    1. 용역연구개발과제 최종보고서...1
    2. 제출문...2
    3. 목차...3
    4. I. 연구개발결과 요약문...4
    5. 최종보고서 요약문...4
    6. Summary...6
    7. II. 총괄연구개발과제 연구결과 ...8
    8. 제1장 총괄연구개발과제의 최종 연구개발 목표 ...8...
    1. 용역연구개발과제 최종보고서...1
    2. 제출문...2
    3. 목차...3
    4. I. 연구개발결과 요약문...4
    5. 최종보고서 요약문...4
    6. Summary...6
    7. II. 총괄연구개발과제 연구결과 ...8
    8. 제1장 총괄연구개발과제의 최종 연구개발 목표 ...8
    9. 1.1 총괄연구개발과제의 목표...8
    10. 1.2 총괄연구개발과제의 목표달성도...12
    11. 1.3 국내.외 기술개발 현황...14
    12. 제2장 총괄연구개발과제의 최종 연구개발 내용 및 방법 ...17
    13. 2.1 연구 내용...18
    14. 2.2 연구 방법...18
    15. 제3장 총괄연구개발과제의 최종 연구개발 결과 ...31
    16. 3.1 미생물을 이용한 간이 시험법...31
    17. 3.2 시료에의 시험조작법...35
    18. 3.3 INT-tetrazolium을 이용한 억제대 판정법...39
    19. 제4장 총괄연구개발과제의 연구결과 고찰 및 결론 ...40
    20. 4.1 현행 식품공전 간이시험법의 보완 및 개선...40
    21. 4.2 효율적인 항생제 검출을 위한 시험 조작법의 개발...42
    22. 4.3 결론...44
    23. 제5장 총괄연구개발과제의 연구성과 ...47
    24. 5.1 활용성과...47
    25. 5.2 활용계획...48
    26. 제6장 기타 주요변경사항 ...49
    27. 제7장 참고문헌 ...50
    28. 제8장 첨부서류 ...52
    29. 1) 게재 논문...53
    30. 2) 학술발표대회 초록...59
    31. 3) 미생물을 이용한 항생제 및 합성항균제 간이 시험법 개정안...60
  • 참고문헌

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