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보고서 상세정보

Lipid raft clustering에 의한 세포의 방사선 감수성의 변화

  • 사업명

    방사선기술개발사업

  • 과제명

    Lipid raft clustering에 의한 세포의 방사선 감수성의 변화

  • 주관연구기관

    전북대학교
    Chonbuk National University

  • 연구책임자

    정국현

  • 참여연구자

    천영민   장윤영   서동원  

  • 보고서유형

    단계보고서

  • 발행국가

    대한민국

  • 언어

    한국어

  • 발행년월

    2010-04

  • 과제시작년도

    2009

  • 주관부처

    교육과학기술부

  • 사업 관리 기관

    한국연구재단

  • 등록번호

    TRKO201000011840

  • 과제고유번호

    1345098644

  • 키워드

    지질뗏목.감마선.세포사멸.lipid raft.gamma radiation.apoptosis.ASMase.

  • DB 구축일자

    2013-04-18

  • 초록 


    Ionizing radiation makes cell signal without ligand interaction between signal molecules and their corresponding receptors, In th...

    Ionizing radiation makes cell signal without ligand interaction between signal molecules and their corresponding receptors, In this study, we hypothesized that lipid rafts on cell membrane have roles in signal transduction induced by radiation. Especially, we developed a hypothesis that radiation induces clustering of lipid rafts and this clustering is essential for signal transduction in cells. Therefore, we tested the hypothesis in this study.
    In the first step of this research, cellular radiosensitivity was tested. Cells were exposed to radiation (0-10 Gy). Apoptosis and cell proliferation were tested and we expected that apoptosis may be apparent at high dose of radiation whereas cells could be proliferated at low dose of radiation. We also guessed that ASMase or DNA-PK translocation in lipid rafts were important for those cellular events. We therefore determined cell viability after ${\gamma}$-ray exposure and the translocation of ASMase and DNA-PK was determined using a flow cytometer.
    In the second stage, reagents for lipid raft disruption were used because we guessed these reagents might reduce the biological effect of radiation. We used nystatin, filipin and methyl-${\beta}$-cyclodextrin for the destruction of lipid rafts. The clustering of lipid raft is well known in the process of NO production by LPS. So, we tested NO production after the treatment of the cells with ${\gamma}$-irradiation and lipid raft destructors.
    In the last step, we tested lipid raft clustering directly after the exposure of radiation. We stained cells with fluorescent dyes and analysed the stained cells. FRET analysis is emerging technique to test the distance between two molecules. Therefore, we analysed lipid raft clustering using FRET techniques.


    방사선이 lipid raft의 구조를 변화시켜 그에 따라 세포가 영향을 받는다는 것을 증명하기 위하여 아래의 범위를 정하여 이를 밝히고자 하였다.
    1. 10 Gy 이내의 ${\gamma}$-선에 의하여 세포...

    방사선이 lipid raft의 구조를 변화시켜 그에 따라 세포가 영향을 받는다는 것을 증명하기 위하여 아래의 범위를 정하여 이를 밝히고자 하였다.
    1. 10 Gy 이내의 ${\gamma}$-선에 의하여 세포의 사멸과 증식이 일어나는 것을 확인.
    2. 세포에 방사선을 조사하였을 때 Acid Sphingomyelinase의 translocation이 일어나는 것을 확인하고 이를 apoptosis와 비교
    3. 세포에 lipid raft 형성을 억제하는 물질을 처리했을 때 세포 사멸의 변화를 확인.
    4. Lipid raft clustering이 일어나는 것으로 알려진 system에서 lipid raft 형성 억제 물질의 영향
    5. 방사선 조사 후 Lipid raft의 직접 분석
    6. FRET 분석법에 의한 방사선에 의한 수용체들의 aggregation 확인


  • 목차(Contents) 

    1. 제출문...1
    2. 보고서 요약서...2
    3. 요약문...3
    4. SUMMARY...5
    5. 목차...7
    6. 제1장 연구개발 과제의 개요...8
    7. 제2장 국내외 개발현황...9
    8. 제1절 연구배경...9
    9. 제2절 국내외 연구와 환경변화...14
    10. 제3장 연구개...
    1. 제출문...1
    2. 보고서 요약서...2
    3. 요약문...3
    4. SUMMARY...5
    5. 목차...7
    6. 제1장 연구개발 과제의 개요...8
    7. 제2장 국내외 개발현황...9
    8. 제1절 연구배경...9
    9. 제2절 국내외 연구와 환경변화...14
    10. 제3장 연구개발 수제 행 내용 및 결과...16
    11. 제1절 방사선에 의한 생존률과 세포사멸...16
    12. 제2절 방사선에 의한 세포사멸과 세포 표면 ASMase과 활성도...17
    13. 제3절 방사선에 의한 세포 증식...18
    14. 제4절 방사선에 의한 DNA-PK의 translocation...20
    15. 제5절 Nystatin처리에 의한 방사선의 세포사멸 효과...22
    16. 제6절 Lipid raft 파괴 물질의 처리 후 방사선 감수성 조사...24
    17. 제7절 Flow cytometer를 이용한 apoptosis 분석...27
    18. 제8절 형광염색에 의한 세포의 확인...30
    19. 제9절 Proliferation assay...32
    20. 제10절 Lipid raft의 분리, 분석...33
    21. 제11절 Immunofluorescence...34
    22. 제12절 타 모델을 이용한 방사선에 의한 lipid raft의 효과의 확인...35
    23. 제13절 FRET 분석...37
    24. 제4장 목표달성도 및 관련분야에의 기여도...39
    25. 제5장 연구개발결과의 활용계획...40
    26. 제6장 연구개발과정에서 수집한 해외과학기술정보 ...41
    27. 제7장 참고문헌...42
    28. 수정ㆍ보완요구사항 반영내역...49
  • 참고문헌

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