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중간엽줄기세포 특이 막단백질 대응 단일클론항체를 이용한 줄기세포의 신속한 분리 및 동정법 개발
Development of rapid isolation and identification methods for mesenchymal stem cells using monoclonal antibodies against cell-specific membrane proteins

  • 사업명

    바이오기술개발사업

  • 과제명

    중간엽줄기세포 특이 막단백질 대응 단일클론항체를 이용한 줄기세포의 신속한 분리 및 동정법 개발

  • 주관연구기관

    제넥셀세인(주)

  • 연구책임자

    김호언

  • 참여연구자

    홍종광   김근수   주혜경   김정혜   정혜란   황수정   박선아  

  • 보고서유형

    1단계보고서

  • 발행국가

    대한민국

  • 언어

    한국어

  • 발행년월

    2009-06

  • 과제시작년도

    2008

  • 주관부처

    교육과학기술부

  • 사업 관리 기관

    한국과학재단
    Korea Science and Engineering Foundtion

  • 등록번호

    TRKO201000011885

  • 과제고유번호

    1345075674

  • 키워드

    중간엽줄기세포.단일클론항체.막단백질체.분리.동정.Mesenchymal Stem Cell.Monoclonal Antibody.Membrane Proteome.Cell Isolation.Cell Identification.

  • DB 구축일자

    2013-04-18

  • 초록 


    In this research, we analyzed the membrane proteome of human MSCs in a comprehensive manner, selected a number of membrane protei...

    In this research, we analyzed the membrane proteome of human MSCs in a comprehensive manner, selected a number of membrane protein candidates that were seemingly specific to MSCs, and generated recombinant proteins by fusing their ectodomains to the Fc domain of mouse antibody. Recombinant proteins were over-expressed in animal cells, purified by Protein G affinity chromatography, and immunized into mice for generation of hybridoma. Monoclonal antibodies against the recombinant proteins were purified from ascites harboring hybridoma, and conjugated with fluorescent dyes and microbeads for determination of MSC identification and isolation efficiency of MSCs through immuostaining and MACS technology.


    본 과제에서는 인간 중간엽줄기세포의 막단백질체를 LC-MS/MS를 통해 광범위하게 분석하고, 중간엽줄기세포의 특이적 존재할 것으로 추정되는 막단백질을 선별하여, 이들의 ectodomain과 Fc domain을 융합시킨 재조합단백질을...

    본 과제에서는 인간 중간엽줄기세포의 막단백질체를 LC-MS/MS를 통해 광범위하게 분석하고, 중간엽줄기세포의 특이적 존재할 것으로 추정되는 막단백질을 선별하여, 이들의 ectodomain과 Fc domain을 융합시킨 재조합단백질을 동물세포에서 과량 발현 및 순수 분리하여 생쥐에 면역하고 생성된 hybridoma을 선별하여, ascite로부터 단일클론항체를 생산 정제한다. 이와 같이 획득한 단일클론항체들은 magnetic microbead 또는 형광물질과 결합시켜서 MACS 및 세포면역법을 통해 세포의 분리와 동정의 정확성 및 효율성을 검증하였다.


  • 목차(Contents) 

    1. 표지...1
    2. 제출문...2
    3. 보고서 요약서...3
    4. 요약문...4
    5. SUMMARY...6
    6. CONTENTS...8
    7. 목차...9
    8. 제 1 장 연구개발과제의 개요...10
    9. 제 2 장 국내외 기술개발 현황...12
    10. 제 3 장 연구개발수행 내용 ...
    1. 표지...1
    2. 제출문...2
    3. 보고서 요약서...3
    4. 요약문...4
    5. SUMMARY...6
    6. CONTENTS...8
    7. 목차...9
    8. 제 1 장 연구개발과제의 개요...10
    9. 제 2 장 국내외 기술개발 현황...12
    10. 제 3 장 연구개발수행 내용 및 결과...14
    11. 제 1 절. 연구개발의 최종 목표...14
    12. 제 2 절. 연차별 연구 목표...14
    13. 제 3 절. 연차별 연구 개발 내용 및 결과...14
    14. 제 4 장 목표달성도 및 관련분야에의 기여도...28
    15. 제 5 장 연구개발결과의 활용계획...30
    16. 제 6 장 연구개발과정에서 수집한 해외과학기술정보...31
    17. 가. 줄기세포 자가증식 관련 유전자 연구...31
    18. 나. Microarray 유전체 연구를 통한 Stemness 유전자 발굴 연구...31
    19. 다. 중간엽줄기세포의 유전체 연구...31
    20. 라. 중간엽줄기세포의 세포막 단백질체 연구...32
    21. 마. 중간엽줄기세포의 새로운 정의...32
    22. 바. 새로운 중간엽줄기세포 마커 출현...32
    23. 제 7 장 참고문헌...33
  • 참고문헌

    1. 전체(0)
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