본문 바로가기
HOME> 보고서 > 보고서 검색상세

보고서 상세정보

신생혈관 형성 억제 단백질 대량생산을 위한 Saccharomyces cerevisiae 발현시스템및 생산공정 개발

  • 사업명

    21C프론티어연구개발사업

  • 과제명

    신생혈관 형성 억제 단백질 대량 생산을 위한 Saccharomyces cerevisiae 발현시스템 및 생산공정 개발

  • 주관연구기관

    목암생명공학연구소
    Mogam Biotech, Institute

  • 연구책임자

    임형권

  • 참여연구자

    김장성   김성근   박정환   우성환   박시형   이재형  

  • 보고서유형

    최종보고서

  • 발행국가

    대한민국

  • 언어

    한국어

  • 발행년월

    2004-03

  • 과제시작년도

    2003

  • 주관부처

    과학기술부

  • 사업 관리 기관

    한국과학재단
    Korea Science and Engineering Foundtion

  • 등록번호

    TRKO201000012015

  • 과제고유번호

    1350001690

  • DB 구축일자

    2013-04-18

  • 초록 


    The goals of this project are 1) a development of the pilot-scale fermentation and
    purification process for the commercializat...

    The goals of this project are 1) a development of the pilot-scale fermentation and
    purification process for the commercialization of GreenstatinTM, LK8 2) an
    achievement of LK8 expression/secretion level of over 300 mg/L by aid of the
    re-engineering of host strain, yeast gene expression profiling, and optimization of
    fed-batch culture processes.
    Production system for LK8 has been established for studying its efficacy for
    anti-angiogenic activities using Pichia pastoris or E. coli expression system.
    However, Escherichia coli system had intrinsic problems such as laborious refolding
    process during scale-up study. Although the successful application of P. pastoris
    system to scaled-up processes, the use of P. pastoris system burdened us with the

    license fee and the royalty that pulls down the international competitiveness of
    commercialization of LK8 as an anti-angiogenic drug.
    Consequently, to overcome these problems and propel the commercialization of
    LK8, the expression system using Saccharomyces cerevisiae was established, in
    which LK8 secreted to culture media. S. cerevisiae was chosen as a candidate for
    production of LK8 because it is an eukaryotic, pyrogen-free, and GRAS (Generally
    Regarded as Safe) microorganism and has an extensive genomic databases, which
    afford us to remodel host genome. The yeast genes affecting the over-production
    and secretion of LK8 was intensively analyzed and the host cell was remodeled for
    the maximizing of productivity of target protein. Using this S. cerevisiae expression
    vector and host system, fermentation processes was optimized with an aid of
    genome-wide analyses during fermentation.
    As results of studies concerning the optimization of fed-batch culture systems and
    the alteration of yeast genome, we obtain a 25-fold increased secretion level of LK8
    compared to the secretion level at the initiation of this study.
    This expression system could be used as the platform technologies for the
    scaled-up process enough to execute the pre-clinical and clinical trials for the
    commercialization of LK8 and the expression system for other therapeutic proteins in
    the near future.


    [1년차] -S. cerevisiae의 유전체 분석체계 확립 (Analysis using DNA micro array) -LK8 단백질 생산을 위한 재조합 S. cerevisiae 시스템의 구축 -최적의 발현 벡터 및 분비서열 확보...

    [1년차] -S. cerevisiae의 유전체 분석체계 확립 (Analysis using DNA micro array) -LK8 단백질 생산을 위한 재조합 S. cerevisiae 시스템의 구축 -최적의 발현 벡터 및 분비서열 확보 -재조합 S. cerevisiae 균주의 생리적 특성 및 LK8 분비 양상 고찰 -재조합 S. cerevisiae 균주에서 유래된 LK8의 특성 분석 [2년차] -LK8 단백질의 접힘과 분비에 관련된 유전자의 탐색 및 동시발현 -발효 조건 및 LK8 단백질 overexpression 에 따른 유전체 발현 양상 분석 -효모 탄소원 대사 생리에 기초한 프로모터 조절 방법 개발 -소규모 생산 공정의 최적화 [3년차] -최적의 유가식 발효전략의 수립 및 검증 -생산 공정 스케일-업 및 분석 -S. cerevisiae 유래 LK8 유효성 검증 -Master Cell Bank 구축 및 분석


  • 목차(Contents) 

    1. 제출문...1
    2. 요약문...2
    3. SUMMARY...4
    4. CONTENTS...5
    5. 목차...6
    6. 제1장 연구개발과제의 개요...8
    7. 제1절 단백질 생산 공정연구에서 효모 유전체 연구의 필요성...8
    8. 제2절 신생혈관 형성 억제를 통한 항암제 개발의 필요성...9...
    1. 제출문...1
    2. 요약문...2
    3. SUMMARY...4
    4. CONTENTS...5
    5. 목차...6
    6. 제1장 연구개발과제의 개요...8
    7. 제1절 단백질 생산 공정연구에서 효모 유전체 연구의 필요성...8
    8. 제2절 신생혈관 형성 억제를 통한 항암제 개발의 필요성...9
    9. 제3절 LK8 대량생산공정 개발의 필요성...9
    10. 제2장 국내외 기술개발 현황...12
    11. 제1절 외국의 경우...13
    12. 제2절 국내의 경우...18
    13. 제3장 연구개발수행 내용 및 결과...19
    14. 제1절 재조합 S. cerevisiae 발현 시스템 구축...20
    15. 제2절 LK8발현에 따른 관련 유전자 분석 및 응용...35
    16. 제3절 Pilot scale 배양 및 정제공정 확립...49
    17. 제4장 목표달성도 및 관련분야에의 기여도...66
    18. 제5장 연구개발결과의 활용계획...69
    19. 제1절 향후 실용화 및 활용계획...70
    20. 제2절 연구개발성과의 응용잠재력 및 사업화시의 활용가능성...70
    21. 제6장 연구개발과정에서 수집한 해외과학기술정보...71
    22. 제7장 참고문헌...74
  • 참고문헌

    1. 전체(0)
    2. 논문(0)
    3. 특허(0)
    4. 보고서(0)

 활용도 분석

  • 상세보기

    amChart 영역
  • 원문보기

    amChart 영역