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보고서 상세정보

X-ray 결정학을 이용한 유용형질 단백질 기능 분석

  • 주관연구기관

    명지대학교
    MyongJi University

  • 연구책임자

    김주곤

  • 보고서유형

    1단계보고서

  • 발행국가

    대한민국

  • 언어

    한국어

  • 발행년월

    2004-08

  • 주관부처

    과학기술부

  • 사업 관리 기관

    과학기술부
    Ministry of Science & Technology

  • 등록번호

    TRKO201000012631

  • 키워드

    식물 단백질.발현 벡터.탄수화물 분해효소.옥신 신호 전달.구조생물학.Plant protein.Expression vector.Endoinulinase.Aux/IAA.ARF.structural biology.

  • DB 구축일자

    2013-04-18

  • 초록 


    One of the central goals in functional genomics is to assign a specific function to genes, and moreover to characterize the uniqu...

    One of the central goals in functional genomics is to assign a specific function to genes, and moreover to characterize the unique feature of the protein. Two different, a forward and a reverse biology approach using biochemical and crystallographic methods have been employed to elucidate the structure and functional relationship of target proteins from plants and bacteria. These approaches will provide basic framework about how proteins work in a biological network.


    $\circ$ Bacillus subtilis 에서 단백질 발현 vector의 개발
    E. coli 발현 system에서 자주 관찰되는 inclusion body 형성을 피할 수 있음
    Purifica...

    $\circ$ Bacillus subtilis 에서 단백질 발현 vector의 개발
    E. coli 발현 system에서 자주 관찰되는 inclusion body 형성을 피할 수 있음
    Purification cassette 는 정제시 간단한 metal-affinity chromatography 만을 사용하여 단백질 분리를 단순화
    단백질의 yield 는 다른 expression system 과 비교하여 충분한 양을 생산
    $\circ$ 미생물에서 유래한 Arthrobacter sp. S37 의 endoinulinase 의 독특한 N-terminal domain 작용기작 연구
    Hydrophobic residue 들이 기질인 inulin 과의 결합에 관여
    N-terminal domain 은 효소 활성에 필수적인 역할을 담당
    N-terminal domain 은 효소의 dimerization에 관여하는 것으로 추정
    $\circ$ Auxin 신호 전달에 관여하는 유전자의 기능 연구: Arabidopsis thaliana 의 Aux/IAA 및 ARF 유전자 발현, 정제 및 결정화
    상기의 유전자들은 rare codon 이 보충된 E. coli strain ($CodonPlus^{\circledR}$) 에서는 유전자가 His-tag fusion 단백질로 과량 발현
    Aux/IAA 의 fusion 단백질은 TEV 로 성공적으로 His-tag을 제거하여 정제하여, 현재 결정화를 진행
    $\circ$ 벼 유전자의 기능 유추
    기능을 유추하지 못하는 30개의 벼 (Oryza sativa (japonica cultivar-group)) 유전자를 선발(Gene access No. AK070354, AK105080, AK072814, AK059532, AK063768, AK062306, AK063903, AK062204, AK068477, AK059939, AK062489, AK072628, AK105037, AK068583, AK070845, AK058509, AK110671, AK103890, AK072739, AK063083, AK061370, AK066415, AK061111, AK099446, AK070090, AK059133, AK060981, AK064050, AK108197, AK060077, AK058529).
    상기의 유전자들을 subcloning, 발현 하여 3개의 유전자들 (Gene access No. AK059939, AK105037, AK068583) 은 E. coli 에서 발현되는 것으로 관찰.
    현재 단백질을 분리, 정제


  • 목차(Contents) 

    1. 제출문 ...1
    2. 보고서 초록 ...2
    3. 요약문 ...3
    4. SUMMARY ...6
    5. CONTENTS ...10
    6. 목차 ...11
    7. 제1장 연구개발과제의 개요 ...12
    8. 1절 연구개발의 목적 ...12
    9. 2절 연구개발의 중요성 ...12
    10. ...
    1. 제출문 ...1
    2. 보고서 초록 ...2
    3. 요약문 ...3
    4. SUMMARY ...6
    5. CONTENTS ...10
    6. 목차 ...11
    7. 제1장 연구개발과제의 개요 ...12
    8. 1절 연구개발의 목적 ...12
    9. 2절 연구개발의 중요성 ...12
    10. 3절 연구개발의 기대효과 ...14
    11. 제2장 국내외 기술개발 현황 ...16
    12. 1절 국내외 관련분야에 대한 기술개발현황 ...16
    13. 2절 연구결과가 국내외 기술개발 현황에서 차지하는 위치 ...17
    14. 제3장 연구개발 수행 내용 및 결과 ...18
    15. 1절 연구 개발의 이론적, 실험적 접근방법 ...18
    16. 2절 연구내용 ...20
    17. 3절 연구결과 ...25
    18. 제4장 목표달성도 및 관련분야에의 기여도 ...36
    19. 1절 연도별 연구목표 및 달성도 ...36
    20. 2절 관련분야의 기술발전에의 기여도 ...38
    21. 제5 장 연구개발결과의 활용계획 ...40
    22. 1절 과제의 향후 연구 계획 ...40
    23. 2절 타 연구에의 응용 ...40
    24. 제6장 연구개발과정에서 수집한 해외과학기술정보 ...41
    25. 제7장 참고문헌 ...43
  • 참고문헌

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