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보고서 상세정보

Coxsackievirus system을 이용한 유전자 전달 시스템 연구
Study of gene delivery system using coxsackievirus system

  • 사업명

    생물생명공학의약품안전관리

  • 과제명

    Coxsackievirus system을 이용한 유전자 전달 시스템 연구

  • 주관연구기관

    가톨릭대학교 산학협력단

  • 연구책임자

    남재환

  • 참여연구자

    김대선   조영주   김연정   정수영   전은석   윤수현   송현미   주은선  

  • 보고서유형

    최종보고서

  • 발행국가

    대한민국

  • 언어

    한국어

  • 발행년월

    2007-09

  • 과제시작년도

    2007

  • 주관부처

    식품의약품안전청

  • 사업 관리 기관

    식품의약품안전청
    Korea Food & Drug Administration

  • 등록번호

    TRKO201000014844

  • 과제고유번호

    1475003561

  • 키워드

    유전자치료제.콕사키바이러스.심장질환.Gene therapy.Coxsackievirus.Cardiovascular disease.

  • DB 구축일자

    2013-04-18

  • 초록 


    ...


    1. Coxsackievirus의 VP2에서 Immunoreceptor-tyrosine activated motif (ITAM)-like sequences를 발견하였고 이 부분에 존재하는 tyrosine을 phenylalanine으...

    1. Coxsackievirus의 VP2에서 Immunoreceptor-tyrosine activated motif (ITAM)-like sequences를 발견하였고 이 부분에 존재하는 tyrosine을 phenylalanine으로 치환한 mutant 바이러스(YYFF)의 특징을 분석한 결과 wild type (WT) 바이러스에 비해 highly attenuated 되었음을 확인하였다.
    2. 이러한 결과를 바탕으로 YYFF infectious cDNA를 활용하여 외부 유전자를 발현하는 발현 시스템을 개발하였다. 발현 시스템은 다음과 같은 구조를 가지고 있다; YYFF system의 5‘ non-translated region과 VP0 사이에 start codon과 제한효소 polylinker인 AAQEF를 넣고 외부유전자를 삽입한 후 그뒷부분에는 3Cpro의 절단사이트인 ALFQG를 삽입하였다. 동일한 조건으로 WT에 동일한 발현 시스템을 가진 infectious cDNA를 제작하였다.
    3. 이러한 WT/YYFF 발현 시스템의 발현 정도 등을 in vivo에서 확인하기 위하여 reporter로서 정량적/ 정성적 분석이 가능한 renilla gene을 삽입하였다.
    4. 제작된 WT-renilla 바이러스 및 YYFF-renilla 바이러스를 활용하여 balb/c 마우스에 복강으로 접종한 후 시간대별로 장기별 renilla 발현 정도를 다음과 같이 분석하였다.
    1) WT-renilla 바이러스와 YYFF-renilla 바이러스 발현 정도 및 장기별 바이러스 타이터
    2) IP/SC 면역별 renilla 발현 정도
    3) coxsackievirus에 대한 항체 존재 시 coxsackievirus 발현 시스템의 발현 정도
    4) WT-renilla 바이러스와 YYFF-renilla 바이러스 염증 유발
    5) coxsackievirus 발현 시스템의 genetic stability 조사
    6) Adenovirus 발현 시스템과의 비교
    5. 이를 통하여 coxsackievirus 발현 시스템은 단기간에 외부 유전자를 심장, 비장 등에서 급격히 발현 할수 있으며 adenovirus 시스템과 비교 할 때 월등한 발현 정도를 나타내었다.
    6. 이러한 coxsackievirus 발현 시스템을 실제 활용하기 위하여 후보 유전자로 survival gene으로 알려진ardiotrophin-1(CT-1)의 기본적인 생물학적 특징을 관찰 하였고 이를 YYFF 발현 시스템에 cloning하였다.
    7. 1차년도 결과를 활용하여 2차년도에는 실제 기능 유전자인 CT-1/FGF or VEGF등을 발현하고 특징을 관찰 할 계획임.


  • 목차(Contents) 

    1. 용역연구사업 연차 실적.계획서...1
    2. 표지...2
    3. 제출문...4
    4. 목차...5
    5. 당해년도 연구개발사업 실적...6
    6. 1. 연구개발과제의 최종 연구개발목표와 당해년도 연구개발목표...6
    7. 2. 연구개발과제의 당해년도 연구개발내용...8
    8. 3. 연구개발과제의 당해년...
    1. 용역연구사업 연차 실적.계획서...1
    2. 표지...2
    3. 제출문...4
    4. 목차...5
    5. 당해년도 연구개발사업 실적...6
    6. 1. 연구개발과제의 최종 연구개발목표와 당해년도 연구개발목표...6
    7. 2. 연구개발과제의 당해년도 연구개발내용...8
    8. 3. 연구개발과제의 당해년도 연구성과...30
    9. 4. 연구수행에 따른 문제점 및 대책...32
    10. 5. 실적요약문...35
    11. 2 차년도 연구개발사업 계획...42
    12. <총괄연구과제>...43
    13. 1. 요약문...43
    14. 2. 연구개발비 총괄표...44
    15. 3. 연구책임자 인적사항 및 학.경력...52
    16. 4. 참여연구원 편성표...54
    17. 5. 총괄연구과제의 차년도 연구개발목표...58
    18. 6. 총괄연구과제의 차년도 연구개발계획...59
    19. 7. 연차/단계별 연구수행일정...70
    20. 8. 첨부서류...73
    21. <제1세부연구과제>...74
    22. 1. 요약문...75
    23. 2. 차연도 연구개발비 총괄표 (세부과제)...76
    24. 3. 제1세부연구과제의 차년도 연구개발목표...80
    25. 4. 제1세부연구과제의 차년도 연구개발계획...81
    26. 5. 첨부서류...89
  • 참고문헌

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