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보고서 상세정보

한약재의 생리활성성분 분리 및 분석연구 (형개, 하고초)
Isolation and analysis bioactive compounds of Schizonepetae Spica and Prunella Spica

  • 사업명

    의약품등안전관리

  • 과제명

    한약재의 생리활성성분 분리 및 분석연구 (형개, 하고초)

  • 주관연구기관

    성균관대학교 산학협력단

  • 연구책임자

    이강노

  • 참여연구자

    양민철   이규하   김기현   김도훈   이일균   최정욱   정호연   홍종기   김민선   홍주연   이미경   ...  

  • 보고서유형

    최종보고서

  • 발행국가

    대한민국

  • 언어

    한국어

  • 발행년월

    2007-11

  • 과제시작년도

    2007

  • 주관부처

    식품의약품안전청

  • 사업 관리 기관

    식품의약품안전청
    Korea Food & Drug Administration

  • 등록번호

    TRKO201000015013

  • 과제고유번호

    1475003598

  • 키워드

    형개.하고초.생리활성성분.동시분석법.분석법 검증.탐뎀질량분석법.Schizonepetae Spice.Prunellae Spica.bioactive compounds.validation.analytical method development.Fast Atom Bombardment Tandem Mass Spectrometry.

  • DB 구축일자

    2013-04-18

  • 초록 


    ...


    활성 성분 분리를 위한 형개 (20 kg) 및 하고초 (9 kg)을 인수 받았으며, 각 시료에 대한 대조시료 7종에 대해서도 확보 되었으며, 70 % EtOH 추출물을 도출해내었고, 이 추출물을 제2세부, 활성팀, DNA팀에 각각 ...

    활성 성분 분리를 위한 형개 (20 kg) 및 하고초 (9 kg)을 인수 받았으며, 각 시료에 대한 대조시료 7종에 대해서도 확보 되었으며, 70 % EtOH 추출물을 도출해내었고, 이 추출물을 제2세부, 활성팀, DNA팀에 각각 제공하였다. 또한 형개 및 하고초에 대한 80% MeOH 추출물을 확보 하였다.
    성분분리에 있어 먼저 형개의 경우 국산 형개 2 kg을 80 % MeOH을 이용하여 상온에서 3획 추출, 180 g 의 total 엑스를 얻었고, 이것을 n-Hexane, Ethyl acetate 및 n-BuOH을 이용하여 용매분획하여 각각의 분획물을 얻을 수 있었다.
    형개의 n-Hexane 분획에서의 물질 분리는 n-Hexane 분획 8 g을 column chromatography 와 HPLC등을이용하여 총 11종의 화합물을 분리, 구조동정 완료.
    형개의 Ethyl acetate 분획에서 물질 분리는 Ethyl acetate 분획물 18 g을 column chromatography 와 HPLC등을 이용하여 총 6종의 화합물을 분리 및 구조 규명을 완료
    형개의 n-BuOH 분획에서 물질 분리는 n-BuOH 분획물 17 g을 column chromatography 와 HPLC 등을 이용하여 성분들을 분리하였으며, 현재 5종의 화합물에 대하여 구조규명을 완료.
    또한 형개의 경우 정유성분의 분리의 목적으로 중국 강소성 형개의 5 kg을 Petroleum ether을 이용하여 상온에서 2획 추출하여 petroleum ether total 엑스 55 g을 확보할 수 있었고, 현재 성분 분리중에 있으며, n-Hexane 층에서 분리되었던 pulegone 성분을 대량으로 분리하였다.고, 그 외에 19종의 화합물을 분리 하였으며, 현재 구조 규명중에 있으며, 이로서 형개에서 현재 총 42종의 성분을 분리하였으며. 22종의 화합물에 대해서는 구조동정을 완료 하였으며, 20종의 성분에 대해서는 구조동정 중에 있다. 구조동정을 마친 11종의 성분에 대해서는 효능팀에 제출되어진 상태이다.
    하고초의 경우 국산 하고초 2 kg을 80 % MeOH을 이용하여 상온에서 3획 추출하여 120 g의 total 엑스를 얻었고, 이것을 n-Hexane, Ethyl acetate 및 n-BuOH을 이용하여 용매분획하여 각각의 분획물을 얻을 수 있었다. 이에 하고초의 Ethyl acetate 분획과 n-BuOH 분획에 대하여 성분 분리를 진행 하였다.
    먼저 하고초 Ethyl acetate 분획에서 물질 분리는 Ethyl acetate 분획물 20 g을 column chromatography 와 HPLC등을 이용하여 총 15종의 화합물을 분리 및 구조 규명을 완료 하였으며, 하고초의 n-BuOH 분획에서의 물질 분리는 n-BuOH 분획물 17g을 column chromatography 와 HPLC 등을 이용하여 성분을 분리 하였으며, 현재 5종의 화합물을 분리 및 구조동정을 완료 하였다.
    또한 하고초의 화수 Ethyl acetate 분획에서 총 18종의 화합물을 분리 하였으며, 이중 9종의 화합물에 대해서는 구조 동정을 마쳤으며, 최초 진행 되었던 하고초 실험에서 확보된 화합물과 동일한 화합물입을 확인하였으며 계속적으로 양확보를 진행하고 있다. 이로서 하고초에서는 현재 총 38종의 성분을 분리하였으며, 29종의 화합물에 대해서는 구조동정을 완료 하였으며, 9종의 화합물에 대해서는 현재 구조 규명중에 있다. 구조가 확인된 화합물중 15종의 성분에 대해서는 효능팀에 제출되어진 상태이다.
    과학적인 규격화를 위해서 한약재의 기원 연구를 위해 감별전문가에 의해 감정된 하고초에 대하여 성분 분리 정제 팀과의 유기적인 연계를 통해 하고초의 지표성분을 설정하였다. triterpene acid 계열의 지표성분 5종의 HPLC-UV 다성분동시분리 분석과 탄뎀질량분석기를 이용한 지표성분의 구조 동정 및 구조분석을 수행하였다.
    1차년도에는 HPLC를 이용한 하고초에서 추출.분리해 낸 지표성분의 동시분석법 개발을 위해 triterpene acid 계열에 대한 지표성분의 순도를 확인하였고, HPLC-UV를 이용하여 triterpene acid 계열 5종에 대한 성분의 동시분리분석을 진행 하였다. 또한 지표성분의 분석법 검증 (Validation)을 위해 특이성과 선택성, 검량선 작성 및 일내와 일간의 정확도와 정밀도를 측정하였고, 컬럼의 종류, 온도 및 UV wavelength 차이에 의한 완건성을 평가하였다. 그리고 담템질량분석기를 이용한 하고초의 지표성분에 대한 구조분석을 통해 하고초에서 추출.분리 해낸 지표성분의 분자량 측정을 통해 구조를 확인하였으며 triterpene acid 계열 성분의 구조를 분석, 지표성성분의 고분해능 질량 분석 (high-resolution mass)을 측정하였다.
    하고초의 지표성분의 함량을 비교하기 위해 용매와 추출법에 따른 지표성분 함량비교를 진행하였고, 시중 유통이 되고 있는 하고초의 16종의 함량 모니터링을 수행함.


  • 목차(Contents) 

    1. 용역연구사업 연차 실적 . 계획서 ...1
    2. 표지 ...4
    3. 제출문 ...5
    4. 목차 ...6
    5. 당해년도 연구개발사업 실적 ...8
    6. 1. 연구개발과제의 최종 연구개발목표와 당해년도 연구개발목표 ...8
    7. 2. 연구개발과제의 당해년도 연구개발내용 ...10
    8. 3. 연...
    1. 용역연구사업 연차 실적 . 계획서 ...1
    2. 표지 ...4
    3. 제출문 ...5
    4. 목차 ...6
    5. 당해년도 연구개발사업 실적 ...8
    6. 1. 연구개발과제의 최종 연구개발목표와 당해년도 연구개발목표 ...8
    7. 2. 연구개발과제의 당해년도 연구개발내용 ...10
    8. 3. 연구개발과제의 당해년도 연구성과 ...102
    9. 4. 연구수행에 따른 문제점 및 대책 ...108
    10. 5. 실적요약문 ...109
    11. 6. 참고문헌 ...121
    12. 2차년도 연구개발사업 계획 ...124
    13. 총괄연구과제 ...126
    14. 1. 요약문 ...126
    15. 2. 연구개발비 총괄표 ...128
    16. 3. 연구책임자 인적사항 및 학.경력 ...139
    17. 4. 참여연구원 편성표 ...144
    18. 5. 총괄연구과제의 차년도 연구개발목표 ...152
    19. 6. 총괄연구과제의 차년도 연구개발계획 ...153
    20. 7. 연차/단계별 연구수행일정 ...157
    21. 8. 첨부서류 ...161
    22. 제1 세부연구과제 ...166
    23. 1. 요약문 ...167
    24. 2. 차년도 연구개발비 총괄표 (제1 세부과제) ...168
    25. 3. 제1 세부연구과제의 당해연도 연구개발목표 ...173
    26. 4. 제1 세부연구과제의 당해연도 연구개발계획 ...175
    27. 5. 첨부서류 ...177
    28. 제2 세부연구과제 ...179
    29. 1. 요약문 ...181
    30. 2. 2차년도 연구개발비 총괄표 (제 2 세부과제) ...182
    31. 3. 제 2 세부연구과제의 차년도 연구개발목표 ...187
    32. 4. 제 2 세부연구과제의 차년도 연구개발계획 ...189
    33. 5. 첨부서류 ...195
  • 참고문헌

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