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보고서 상세정보

백지의 활성성분 분리, 및 효능유전자 확인 연구
Study on the isolation of biologically active components from Angelica dahurica and the identification of their biomarker genes from oriental medicine

  • 사업명

    독성연구개발

  • 과제명

    한약재의 생리활성성분 분리 및 효능유전자 확인 연구(백지,신이,황백)

  • 주관연구기관

    서울대학교
    Seoul National University

  • 보고서유형

    최종보고서

  • 발행국가

    대한민국

  • 언어

    한국어

  • 발행년월

    2006-11

  • 과제시작년도

    2006

  • 주관부처

    식품의약품안전청
    Korea Food & Drug Administration

  • 등록번호

    TRKO201000015090

  • 과제고유번호

    1470001459

  • 키워드

    백지.생리활성성분.분리.bioactive component.biomarker gene.assay.

  • DB 구축일자

    2013-04-18

  • 초록 


    Angelica dahurica Benth. et Hook. f. (Umbelliferae) has long been used traditionally as anti-inflammatory, diuretic and expectora...

    Angelica dahurica Benth. et Hook. f. (Umbelliferae) has long been used traditionally as anti-inflammatory, diuretic and expectorant agents, and remedy for hepatitis, arthritis, indigestion, headaches, fever, colic and rheumatism in the East. This study was performed to establish analytical methods for the constituents of this plant and verifyhepatoprotective activity. Five coumarins, isoimperatorin, phellopterin, imperatorin, oxypeucedanin and byakangelicol, were isolated from MeOH extract of the dried roots by repeated column chromatography. Each compound was validated to develop the standardization method for commercial A. dahurica using HPLC/UV and HPLC/MS(/MS). The validation of analytical method included tests for linearity, precision, accuracy and robustness. The exponential linear calibration curves were observed for five furanocoumarins with $R^2$ being >0.9996, and the precision values of quality control samples were in the range of 0.47-15.76% for HPLC/UV, 1.16-8.25% for HPLC/MS(/MS) for inter- and intra-day. The accuracy values were in the range of 95.89-117.62% and 91.77-112.68% for HPLC/UV, and HPLC/MS(/MS), respectively, for intra- and inter-day. The 70% ethanol extract and five coumarins of A. dahurica exhibited a potent hepatoprotective activity against cytokine (TNF-$\alpha$, TRAIL)-induced hepatotoxicity of HepG2 cells. The results demonstrated that ethanol extract and its major constituents might be a good candidate for chemopreventive agents for cytokine-induced hepatotoxicity.


    백지의 지표물질의 분리 및 지표물질에 준하는 isoimperatorin, imperatorin, phellopterin, oxypeucedanin, byakangelicol, scopoletin, byakangelicin, oxyp...

    백지의 지표물질의 분리 및 지표물질에 준하는 isoimperatorin, imperatorin, phellopterin, oxypeucedanin, byakangelicol, scopoletin, byakangelicin, oxypeucedanin hydrate, nodakenin, 3’-hydroxymarmesinin의 10종의 성분을 분리 및 규명하였다. 이 중 isoimperatorin, imperatorin, phellopterin, oxypeucedanin, byakangelicol의 5종 성분을 HPLC/UV 또는 HPLC/MS(MS)를 이용한 백지의 생리활성성분의 동시분석법 개발 및 함량분석법 확립하였다. 또한 백지의 추출물과 분리화합물의 약리효능 검색조건 확립을 위하여 HepG2 cell 을 이용하여 간세포 보호작용을 검색할 수 있는 시험조건을 확립하였다. 백지 추출물 (70%EtOH Ex) 및 분리화합물 5종(imperatorin, isoimperatorin, byakangelicol, oxypeucedanin, phellopterin)이 LPS, cytokine 등에 의해 유도되는 간세포사멸을 효과적으로 저해하였으며 ER stress라는 만성질환을 유도하는 stress를 세포에 주었을 때의 세포 사멸 및 ER stress marker 유전자의 발현을 효과적으로 저해하는 것을 조건을 확립하였으며 추출물 및 분리화합물 처리에 의한 세포주 gene expression profile 조사하였으며, ABI1700 (30K, version 2.0) microarray를 사용하여, 백지추출물(2가지 용량)과 분리화합물 5종을 처리하여 유전자 발현변화를 관찰하였다. 유전자 칩 hybridization으로부터 얻은 데이터에서 적절한 filtering (signal to noise ratio (S/N) >3)을 수행한 후, 각 실험군에서 ANOVA 또는 t-tes p <0.05 이며 발현변화가 $\geq$1.5-fold 인 유전자를 비교분석하여 후보효능 유전자들을 결정하였다. 향후 후보 효능유전자들의 발현을 RT-PCR 또는 real time RT-PCR을 수행하여 효능유전자로서의 가능성을 확인할 것이며, Chip 을 scan하여 얻은 raw data를 식약청 DB (한약재 유전자 발현정보 관리시스템)에 제공하여 분석을 validation 하고, 약리 유전자 DB를 구축할 예정이다.


  • 목차(Contents) 

    1. 용역연구사업 연구결과보고서 ...1
    2. 표지 ...2
    3. 제출문 ...4
    4. 목차 ...5
    5. I. 연구개발결과 요약문 ...7
    6. 연구결과보고서 요약문 ...7
    7. Summary ...8
    8. II. 총괄연구개발과제 연구결과 ...9
    9. 제1장 총괄연구개발과제의 최종...
    1. 용역연구사업 연구결과보고서 ...1
    2. 표지 ...2
    3. 제출문 ...4
    4. 목차 ...5
    5. I. 연구개발결과 요약문 ...7
    6. 연구결과보고서 요약문 ...7
    7. Summary ...8
    8. II. 총괄연구개발과제 연구결과 ...9
    9. 제1장 총괄연구개발과제의 최종 연구개발 목표 ...9
    10. 제2장 총괄연구개발과제의 최종 연구개발 내용 및 방법 ...13
    11. 제3장 총괄연구개발과제의 최종 연구개발 결과 ...19
    12. 제4장 총괄연구개발과제의 연구결과 고찰 및 결론 ...60
    13. 제5장 총괄연구개발과제의 연구성과 ...65
    14. 제6장 기타 중요변경사항 ...66
    15. 제7장 참고문헌 ...67
    16. 제8장 첨부서류 ...69
    17. 별첨(분리성분의분리량및제출량) ...69
    18. III. 제1세부연구개발과제 연구결과 ...70
    19. 제1장 세부연구개발과제의 최종 연구개발 목표 ...71
    20. 제2장 세부연구개발과제의 최종 연구개발 내용 및 방법 ...74
    21. 제3장 세부연구개발과제의 최종 연구개발 결과 ...77
    22. 제4장 세부연구개발과제의 연구결과 고찰 및 결론 ...103
    23. 제5장 세부연구개발과제의 연구성과 ...104
    24. 제6장 기타 중요변경사항 ...105
    25. 제7장 참고문헌 ...106
    26. 제8장 참고서류 ...106
    27. 별첨(분리성분의분리량및제출량) ...107
    28. IV. 제2세부연구개발과제 연구결과 ...114
    29. 제1장 세부연구개발과제의 최종 연구개발 목표 ...115
    30. 제2장 세부연구개발과제의 최종 연구개발 내용 및 방법 ...120
    31. 제3장 세부연구개발과제의 최종 연구개발 결과 ...124
    32. 제4장 세부연구개발과제의 연구결과 고찰 및 결론 ...146
    33. 제5장 세부연구개발과제의 연구성과 ...149
    34. 제6장 기타 중요변경사항 ...151
    35. 제7장 참고문헌 ...152
    36. 제8장 첨부서류 ...152
    37. V. 제3세부연구개발과제 연구결과 ...156
    38. 제1장 세부연구개발과제의 최종 연구개발 목표 ...157
    39. 제2장 세부연구개발과제의 최종 연구개발 내용 및 방법 ...159
    40. 제3장 세부연구개발과제의 최종 연구개발 결과 ...166
    41. 제4장 세부연구개발과제의 연구결과 고찰 및 결론 ...194
    42. 제5장 세부연구개발과제의 연구성과 ...196
    43. 제6장 기타 중요변경사항 ...197
    44. 제7장 참고문헌 ...198
    45. 제8장 첨부서류 ...199
  • 참고문헌

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