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보고서 상세정보

한약재의 생리활성성분 분리 및 효능유전자 확인연구-황금, 단삼
Study on the Isolation of Bioactive Components and the Identification of Biomarker Genes from Oriental Herbal Medicines (Project 2 : Scutellaria Roots, Salvia Miltiorrhiza Roots)

  • 사업명

    독성연구개발

  • 과제명

    한약재의 생리활성성분 분리 및 효능유전자 확인 연구(황금, 단삼)

  • 주관연구기관

    안동대학교
    AnDong National University

  • 연구책임자

    손건호

  • 보고서유형

    최종보고서

  • 발행국가

    대한민국

  • 언어

    한국어

  • 발행년월

    2006-12

  • 과제시작년도

    2006

  • 주관부처

    식품의약품안전청

  • 사업 관리 기관

    식품의약품안전청
    Korea Food & Drug Administration

  • 등록번호

    TRKO201000015121

  • 과제고유번호

    1470000085

  • 키워드

    활성 성분분리.분석법.효능유전자.황금.단삼.LC-MS/MS 분석법.solation of bioactive components.method of analysis.bio-marker genes.Scutellaria Root.Salvia Miltiorrhiza Root.LC-MS/MS analysis.Isolation of bioactive components.

  • DB 구축일자

    2013-04-18

  • 초록 


    In the first sub-project, we have isolation bioactive compound from Scutellariae Radix (Scutellaria baicalensis) and Salvia milti...

    In the first sub-project, we have isolation bioactive compound from Scutellariae Radix (Scutellaria baicalensis) and Salvia miltiorrhizae Radix (Salvia miltriorrhiza). In our studies on Scutellaria Radix, we isolated seventeen flavonoids and two phenolic compounds, guaiacol and paeonol. Also we isolated five diterpenoid and six lignin from Salvia miltiorrhizae Radix. Their structures were elucidated on the basis of spectroscopic analyses and chemical evidence.
    In the second sub-project, we have developed both a HPLC and a LC-MS/MS analytical methods to determine six or seven marker compounds from herbal drugs, Scutellariae Radix (Scutellaria baicalensis) and Salvia miltiorrhizae Radix (Salvia miltriorrhiza). Calibration graph showed good linearity across wide concentration ranges of the marker compounds. The simple analytical procedure has shown good accuracy and precision, and therefore is proposed an efficient method for fingerprinting analysis as well as quality control of the herbal drug. Quantities of marker compounds from collected samples of Scutellariae Radix and Salvia miltiorrhizae Radix were assayed.
    In the third sub-project, gene expression pattern associated with sensitivities to each agent were analyzed with oligonucleotide arrays that comprised approximately 30,000 genes. This study were used DNA microarray data for mouse whole genes to examine the change of effective gene activity of 70% EtOH extracted from Scutellariae Radix, Salviae Miltiorrhizae Radix and their ingredients such as baicalein, wogonin, chrysin, tanshinone I, cryptotanshinone, rosmarinic acid, salvianolic acid B on LPS treated macrophage cell line. Based on analysis, 20 genes were selected for further anaysis from 33,000 whole genes in microarray. The genes were validated by RT-PCR. The broad spectrum of the differentially expressed genes, including those associated with inflammation, apoptosis, anti-oxidants, as well as others, IL-11 R α1, IL-6 ST and Tgfb1, indicate overall cellular response to Scutellariae Radix, Salviae miltiorrhizae Radix and compounds treatment.


    제1세부과제에서는 황금과 단삼으로부터 생리활성성분을 분리하고자 하였다. 황금과 단삼을 추출 및 분획하고 이들을 각각 크로마토그라피를 실시하여 다음의 물질들을 분리하였다. 각각을 분광학적 수단을 사용하여 구조결정한 결과 황금은 17종...

    제1세부과제에서는 황금과 단삼으로부터 생리활성성분을 분리하고자 하였다. 황금과 단삼을 추출 및 분획하고 이들을 각각 크로마토그라피를 실시하여 다음의 물질들을 분리하였다. 각각을 분광학적 수단을 사용하여 구조결정한 결과 황금은 17종의 flavonoids 화합물과 phenolic 화합물인 guaiacol과 paeonol 2종임을 확인하였고 단삼은 diterpenoid 5종과 lignin 6종임을 확인하였다. Flavonoid 화합물은 oroxylin A, chrysin, tanaxin I, skullcapflavone II, rivularin, wogonin, baicalein, 2‘,5,6’- trihydroxy-7,8-dimethoxyflavone, 2‘,5,7-trihydroxy-6’,8- dimethoxyflavone, 5,7,2′,6′-tetrahydroxyflavone, 5,7,2′,5′-tetrahydroxy-8,6′-dimethoxyflavone, wogonin-7-Oglucuronic acid methyl ester, 6″-ethyl-wogonoside, viscidulinIII-2'-O-glucoside, wogonoside, rutin, baicalin임을 확인하였다. diterpenoid화합물은 tanshinone IIΑ, tanshinone I, cryptotanshinone, 15, 16-dihydrotanshinone I과 dansenspiroketallacton임을 알았고 lignin은 salvianolic acid B, rosmarinic acid, 9'-methyl lithospermate, methyl lithospermate B, dimethyl lithospermate B와 methyl salvianolic acid C임을 확인하였다.
    제 2세부과제에서는 황금과 단삼에 함유된 생리활성물질들 (황금의 경우 HPLC법은 6종,LC-MS/MS법은 7종, 단삼의 경우 HPLC법과 LC-MS/MS법 모두 6종)의 동시정량법을 HPLC/UV법과 LC-MS/MS 법으로 각각 새로이 개발하였다. 동시정량법에 대한 validation을 실시함으로써 동시분석법에 대한 타당성을 입증하였다. 황금과 단삼의 시중 유통품 (황금은 8종, 단삼은 16종)에 대해 활성성분의 함량을 측정하였다.
    제 3세부에서는 한약재 및 각 약재별 유효 성분을 제시하고 각각의 효능을 제시하고자 DNA microarray를 이용하였다. 한약재추출물 또는 성분을 처리 후 약 3만개의 유전자 중 발현 변화를 나타내는 효능 유전자를 발굴하고자 청열약으로 분류되는 황금과 활혈거어약으로 분류되는 단삼 및 그 성분들을 LPS 처리한 대식세포에 처리하여 항염 효과 및 항산화 효능을 검색하였다. 황금의 항염 효능 성분으로는 baicalein, wogonin, chrysin을 제시하였고, 단삼의 항산화 효능 성분으로 tanshinone I, cryptotanshinone, rosmarinic acid, salvianolic acid B을 제시하였다. DNA microarray 분석결과 inflammation, apoptosis, anti-oxidant 등과 관련된 pathway 관련 유전자들의 발현 변화가 가장 크게 나타났으며 선정한 효능 유전자들에 대해서 RT-PCR을 이용한 검증결과 IL-11 R $\alpha$1, IL-6 ST, Tgfb1 등의 유전자를 효능 유전자로 제시하였다.


  • 목차(Contents) 

    1. 용역연구사업 연구결과보고서 ...1
    2. 연구과제제안서 (REP)...2
    3. 표지 ...3
    4. 제출문 ...5
    5. 목차 ...6
    6. I. 연구개발결과 요약문 ...8
    7. 연구결과보고서 요약문 ...8
    8. Summary ...9
    9. II. 총괄연구개발과제 연구결과 ...1...
    1. 용역연구사업 연구결과보고서 ...1
    2. 연구과제제안서 (REP)...2
    3. 표지 ...3
    4. 제출문 ...5
    5. 목차 ...6
    6. I. 연구개발결과 요약문 ...8
    7. 연구결과보고서 요약문 ...8
    8. Summary ...9
    9. II. 총괄연구개발과제 연구결과 ...10
    10. 제1장 총괄연구개발과제의 최종 연구개발 목표 ...10
    11. 제2장 총괄연구개발과제의 최종 연구개발 내용 및 방법 ...19
    12. 제3장 총괄연구개발과제의 최종 연구개발 결과 ...30
    13. 제4장 총괄연구개발과제의 연구결과 고찰 및 결론 ...46
    14. 제5장 총괄연구개발과제의 연구성과 ...51
    15. 제6장 기타 중요 변경사항 ...55
    16. 제7장 참고문헌 ...56
    17. 제8장 첨부서류 ...60
    18. III. 제1세부연구개발과제 연구결과 ...61
    19. 제1장 세부연구개발과제의 최종 연구개발 목표 ...62
    20. 제2장 세부연구개발과제의 최종 연구개발 내용 및 방법 ...69
    21. 제3장 세부연구개발과제의 최종 연구개발 결과 ...73
    22. 제4장 세부연구개발과제의 연구결과 고찰 및 결론 ...81
    23. 제5장 세부연구개발과제의 연구성과 ...91
    24. 제6장 기타 중요 변경사항...94
    25. 제7장 참고문헌 ...95
    26. 제8장 첨부서류 ...97
    27. IV. 제2세부연구개발과제 연구결과 ...98
    28. 제1장 세부연구개발과제의 최종 연구개발 목표 ...99
    29. 제2장 세부연구개발과제의 최종 연구개발 내용 및 방법 ...102
    30. 제3장 세부연구개발과제의 최종 연구개발 결과 ...113
    31. 제4장 세부연구개발과제의 연구결과 고찰 및 결론 ...150
    32. 제5장 세부연구개발과제의 연구성과 ...152
    33. 제6장 기타 중요 변경사항 ...154
    34. 제7장 참고문헌 ...154
    35. 제8장 첨부서류 ...156
    36. V. 제3세부연구개발과제 연구결과 ...157
    37. 제1장 세부연구개발과제의 최종 연구개발 목표 ...158
    38. 제2장 세부연구개발과제의 최종 연구개발 내용 및 방법 ...160
    39. 제3장 세부연구개발과제의 최종 연구개발 결과 ...165
    40. 제4장 세부연구개발과제의 연구결과 고찰 및 결론 ...228
    41. 제5장 세부연구개발과제의 연구성과 ...230
    42. 제6장 기타 중요 변경사항 ...232
    43. 제7장 참고문헌 ...233
    44. 제8장 첨부서류 ...234
  • 참고문헌

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