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보고서 상세정보

Targeted cancer therapy에 있어서 VRK3의 생체 내 역할 규명 및 암세포에서의 기능 규명
Discovery of new drug lead compounds for target proteins of stomach and liver cancers

  • 과제명

    Targeted cancer therapy에 있어서 VRK3의 생체 내 역할 규명 및 암세포에서의 기능 규명

  • 주관연구기관

    포항공과대학교 산학협력단

  • 보고서유형

    최종보고서

  • 발행국가

    대한민국

  • 언어

    한국어

  • 발행년월

    2010-05

  • 과제시작년도

    2009

  • 주관부처

    교육과학기술부

  • 사업 관리 기관

    한국연구재단
    National Research Foundation of Korea

  • 등록번호

    TRKO201000015287

  • 과제고유번호

    1345098595

  • 키워드

    VRK3,인산화효소,암,유전자결손생쥐,ERK 신호전달계VRK3,Kinase,Cancer,gene knock-out mouse,ERK signaling pathway

  • DB 구축일자

    2013-04-18

  • 초록 


    (1) purification of VRK3 and VHR protein- Cloning of WT and mutant formed VRK3 and VHR
    gene into pGEX4T3-TEV vector. Induction...

    (1) purification of VRK3 and VHR protein- Cloning of WT and mutant formed VRK3 and VHR
    gene into pGEX4T3-TEV vector. Induction of recombinant protein in BL21-pLysS E.coli strain.
    Purification of proteins by chromatography method using FPLC
    (2) Biochemical analysis of purified proteins and activity test- analysis of the activity of VHR
    phosphatase by immunoblotting method. We used ERK2 as substrate of VHR and analyzed the
    ratio between p-ERK and ERK Research for the relatiohship between activity and interaction.
    (3) Production of VRK3 knock-out mice- We purchased KS cell line which traped VRK3 gene
    with reporter constl1.lct. ES cells were injected in the blastocyst and transplantatcd. we gained
    chimera and COnfil111ed gCl111line transmission. We identified genotype by PCR method and
    southern blotting.
    (4) Identification of the interacting partner of VRK3- purification of interacting
    partner using immunoprecipitation and identification of proteins with MALDI -TOF
    Mass spectrometry.


    ERK는 여러 가지 암에서 과발현 되어 있으며 암세포의 증식을 억제하기 위한 타깃으로 보고되고 있
    음. VRK3 는 VHR과 결합하여 ERK의 인산화를 조절하여 활성을 조절함. 본 연구팀에서는
    VRK3-VHR-ERK 복합...

    ERK는 여러 가지 암에서 과발현 되어 있으며 암세포의 증식을 억제하기 위한 타깃으로 보고되고 있
    음. VRK3 는 VHR과 결합하여 ERK의 인산화를 조절하여 활성을 조절함. 본 연구팀에서는
    VRK3-VHR-ERK 복합체를 포유동물의 조직에서 검증하였음. VRK3 는 성채 생쥐의 정소와 신장에서
    발현이 높았으며 생쥐 태아의 발달과정중에서 높은 발현을 보였음. VRK3 의 발현이 높은 조직에서
    ERK 활성이 저하되어 았음을 확인함으로서 VRK3가 생채 발달과정에서 직접적으로 ERK 선호전달
    계를 조절하고 았음을 알 수 있었음. 또한 VRK3 의 기능을 얄아보기 위해 유전자결손생쥐를 제작하였
    으며 이 생쥐는 변역기능에 이상을 보임을 획인하였읍. VRK3는 흉션조직에서 많은 발현을 보였으며
    VRK3가 결손된 흉션 조직에서는 ERK 인산화가 상대적으로 증가되어 있었음. 결과 VRK3 결손 생쥐
    는 thymic atrophy가 조기에 일어나는 양상을 보였음. VRK3 상호작용 단백질을 규명하기 위해 면역
    침전법을 시행하였고 HSP70 단백질이 상호작용하는 것을 발견하였음. 본 연구진은 위의 결과를 바탕
    으로 VRK3 가 생채 수준에서 ERK 산호전달계를 조절함으로서 여리 가지 기관의 발달과정에 관여하고 있음을 알 수 있었음.


  • 목차(Contents) 

    1. 표지 ... 1
    2. 제출문 ... 4
    3. 보고서 초록 ... 5
    4. 요약문 ... 6
    5. SUMMARY ... 9
    6. CONTENTS ... 12
    7. 목차 ... 25
    8. 제1장 연구개발과제의 개요 ... 25
    9. 가. 연구개발의 목적 ... 25
    10. 나....
    1. 표지 ... 1
    2. 제출문 ... 4
    3. 보고서 초록 ... 5
    4. 요약문 ... 6
    5. SUMMARY ... 9
    6. CONTENTS ... 12
    7. 목차 ... 25
    8. 제1장 연구개발과제의 개요 ... 25
    9. 가. 연구개발의 목적 ... 25
    10. 나. 연구개발의 필요성 ... 25
    11. 제2장 국내외 기술개발 현황 ... 27
    12. 제3장 연구개발수행 내용 및 결과 ... 28
    13. 1. 포유동물에서 VRK3에 의한 VHR의 활성 조절 규명 ... 28
    14. 2. CRK3 유전자결손생쥐에 대한 연구 ... 30
    15. 3. CRK3의 새로운 상호작용 단백질 탐색 ... 32
    16. 제4장 목표달성도 및 관련분야에의 기여도 ... 34
    17. 제5장 연구개발결과의 활용계획 ... 35
    18. 제6장 연구개발과정에서 수집한 해외과학기술정보 ... 36
    19. 제7장 참고문헌 ... 37
    20. 끝페이지 ... 39
  • 참고문헌

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