본문 바로가기
HOME> 보고서 > 보고서 검색상세

보고서 상세정보

죽염의 90일 경구 반복투여 독성시험 및 면역독성시험
Ninety days Repeated Dose Toxicity and Immunotoxicity study of JukYom in Rats

  • 사업명

    식품의약품안전성관리

  • 과제명

    죽염의 90일 반복투여독성시험 및 면역독성 시험

  • 주관연구기관

    (주)바이오톡스텍

  • 연구책임자

    이종성

  • 보고서유형

    최종보고서

  • 발행국가

    대한민국

  • 언어

    한국어

  • 발행년월

    2003-11

  • 과제시작년도

    2003

  • 주관부처

    식품의약품안전청

  • 사업 관리 기관

    식품의약품안전청
    Korea Food & Drug Administration

  • 등록번호

    TRKO201000016510

  • 과제고유번호

    1470000688

  • 키워드

    죽염.반복독성.면역독성.JukYom(Bamboo salt).repeated dose toxicity.immunotoxcity.

  • DB 구축일자

    2013-04-18

  • 초록 


    [1] 90 days repeated dose toxicity
    In this GLP study, 6 main study groups of 10 F344 rats/sex were given vehicle, 125, 250, 50...

    [1] 90 days repeated dose toxicity
    In this GLP study, 6 main study groups of 10 F344 rats/sex were given vehicle, 125, 250, 500, 1000, 2000 mg/kg JukYom(bamboo salt) and 2000 mg/kg Natural Sea Salt for 90 days.
    The single dose toxicity study of 2000 and 5000 mg/kg was conducted to select the dose of 90-day repeated dose toxicity study. Languid and mucous stool were observed on the day of the administration but recovered on day 1 in female 2000 mg/kg. Languid, mucous stool, prone position, lacrimation, lyning on side, dyspnea, watery diarrhea, convulsion and polyuria were observed in the 5000 mg/kg. These were considered due to administration of JukYom. The mortality of the male and female were 80% and 100%, respectively. In the results of the single dose toxicity study, the 14-day dose range finding study was conducted. JukYom was orally administered to male and female F344 rats at dosages of 0(control), 125, 250, 500, 1,000 and 2,000 mg/kg for 2 weeks. In the results of the study, there was no treatment-related toxicity of 2000 mg/kg. Therefore, the high dose of 90-day repeated dose toxicity study was established as 2000 mg/kg and the low dose was established as 250 mg/kg which was the intake per day of the salt (10~15 g/60 kg, 0.16∼0.25 g/kg).
    Standard endpoints in this study included mortality, clinical observations, change of body weights, analysis on food and water consumption, ophthalmoscopic examination, hematologic examination, serum biochemistry, analysis of organ weights, gross anatomic pathologyand histopathology. Sperm morphology and vaginal cytology were conducted. In the spleen, B and T cell proliferation test were performed.
    There was no treatment-related death. Diarrhea was observed temporarily and recovered in some animals of the treatment groups of JukYom and Natural Sea Salt.
    Body weights were significantly decreased in male given groups 2000 mg/kg JukYom and Natural Sea Salt dose. There was decreasing tendency of food consumptions in the treatment groups of JukYom. Water consumptions were significantly increased in male given groups 500, 1000 and 2000 mg/kg JukYom and 2000 mg/kg Natural Sea Salt dose, while in female given groups 1000, 2000 mg/kg JukYom and 2000 mg/kg Natural Sea Salt dose.
    There were no treatment-related findings in opthalmoscopic examination, urinalysis, hematology, serum biochemistry and sperm morphology. There were no treat-related findings in sperm morphology. Vaginal anestrous cycles were prolonged in female given groups 1000 and 2000mg/kg doses. B and T cell proliferation in spleen were not increased between control and treatment groups.
    In the analysis of organ weights, absolute and relative weights of brain, thymus, lung, liver and right kidney were significantly increased or decreased in male given groups 2000mg/kg Natural Sea Salt dose.
    Absolute and relative weights of submaxillary gland, liver, lung and right kidney were significantly increased or decreased in male given groups 1000 and 2000mg/kg JukYom dose but there were no histopathological abnormalities.
    In female given groups 1500 and 2000 mg/kg JukYom dose, uterus weight was decreased but there were no histopathological abnormalities. In the histopathological findings of the uterus, metestus were observed in 3/10of the control, in 3/10 of Natural Sea Salt dose, in 6/10 of 500 mg/kg, in 6/10 of 1000 mg/kg, in 2/10 of 1500 mg/kg and in 6/10 of 2000 mg/kg JukYom dose and diestrus was observed in 1500 and 2000 mg/kg JukYom dose.
    There were no treatment-related findings in the scheduled necropsy and the histopathological exnaminations.
    In the result of the 26 weeks repeated dose study of JukYom, changes of food and water consumption were observed the due to treatment of JukYom. There was decreasing tendency (approximately 10%) in mean body weight of the male 2,000 mg/kg JukYom dose. In the female JukYom dose, the uterus weight was decreased and there was the effect of the regulation of the estrus cycle. There were no differences between JukYom and Natural Sea Salt in clinical observations, body weights, food and water consumption, hematologic examination, serum biochemistry, analysis of organ weights and gross anatomic pathology. Therefore, no observed effect level (NOEL) is considered to be 250 mg/kg and maximum tolerance dose (MTD) is considered to be 2,000 mg/kg on the male and female F344 rats.
    [2] Immunotoxicity
    To clarify the antigenicity of bamboo salt, we employed active systemic anaphylaxis (ASA) and passive cutaneous anaphylaxis (PCA) tests, using guinea pig models. In ASA test, male 6 groups of Hartley guinea pigs were sensitized with the vehicle, natural sea salt+FCA, low dose (200 mg/kg), high dose (300 mg/kg), Freund's complete adjuvant(FCA) + high dose of bamboo salt and ovalbumin + FCA. Antigen were injected intravenously 15 days later, the anaphylaxis shock reactions were then recorded. In PCA test, serums diluted to 10-and 5120-fold were injected intradermally on the back of guinea pigs, then four hours later, challenging antigen were injected intravenously.
    As a result of ASA shock reactions observation, moderate symptoms of evacuation were observed in 3 for 6 heads in the negative control group. A moderate symptoms of urination were observed in 2 for 6 heads in the vehicle group. A mild symptoms of urination were observed in 2 for 6 heads in the high dose group, but a negative reaction was observed in the low dose. A mild symptoms of urination were observed in 2 for 6 heads in the high dose + FCA group. In the positive control group, hyperpnea, dyspnea, convulsion and side position representative ASA shock reaction symptoms were observed in 6 for 6 heads and all animals were died within 10 minutes.
    In passive cutaneous anaphylaxis reaction test, negative reactions were observed in negative control group, vehicle group, low dose group, high dose group and high dose+FCA group, while there was positive reaction of maximum dilution drainage 160-fold in positive control group.
    Based on this result, it was concluded that bamboo salt has no antigenic potential demage under the condition of this study.


    [1] 90일 경구 반복독성시험
    죽염에 대한 독성을 평가하고자, F344 rat를 사용하여 죽염을 암수 각각 0, 125, 250, 500, 1000, 2000 mg/kg의 농도로 90일간 강제 경구 투여하였으며, 대조물질투여...

    [1] 90일 경구 반복독성시험
    죽염에 대한 독성을 평가하고자, F344 rat를 사용하여 죽염을 암수 각각 0, 125, 250, 500, 1000, 2000 mg/kg의 농도로 90일간 강제 경구 투여하였으며, 대조물질투여군으로 천일염을 2000 mg/kg 투여군을 설정하였다. 90일 반복투여 독성시험의 투여용량 설정은 2000 및 5000 mg/kg 용량으로 단회투여 독성시험을 실시한 결과, 투여 당일 암·수 2,000 mg/kg 투여군에서는 무기력 및 점액성 변이 관찰되었으나, 투여 1일째부터는 회복되어 관찰기간동안 특이한 증상은 관찰되지 않았다. 5,000 mg/kg 투여군에서는 무기력, 점액변, 복와위, 유루, 횡와위, 호흡곤란, 수양성설사, 경련 및 다뇨의 다양한 증상이 관찰되었는데 시험물질 투여에 기인한 소견으로 사료되며, 수컷 80% 및 암컷 100%의 사망률이 관찰되었다. 단회투여 독성시험결과를 토대로 125, 250, 500, 1000 및 2000 mg/kg 용량으로 14일 반복투여 용량결정시험을 실시하였다. 그 결과, 암·수 2,000 mg/kg 투여군에서 특이한 독성소견이 관찰되지 않아 90일 반복 투여 독성시험의 고용량은 2,000 mg/kg으로, 저용량은 소금의 일일섭취권장량인 10~15 g/60 kg (0.16~0.25 g/kg)에 해당하는 250 mg/kg으로 설정하였다.
    90일 반복투여 독성시험의 투여기간동안 일반증상 및 사망동물의 유무와 체중, 사료, 음수 섭취량, 안검사, 뇨검사, 혈액학적 및 혈액 생화학적 검사를 수행하였다. 생식독성 검사로서 부검시 정자형태검사와 관찰기간동안 질세포 검사를 수행하였다. 부검시 체내외 장기 조직에 대하여 육안적 관찰 및 장기무게를 측정하였고, 주요장기에 대해 조직병리학적 검사를 수행하였다. 부검시 취한 비장세포를 원심분리하여 T 림프구에 대한 유약화 반응시험을 수행하였다.
    관찰기간동안 죽염투여에 의한 사망례는 관찰되지 않았다. 죽염투여군 및 대조물질투여군 일부개체에서 일시적인 설사가 관찰된 후 회복되었으나 그 외 특이한 증상은 관찰되지 않았다.
    투여기간동안 수컷의 경우 체중에 있어서 천일염 및 죽염 2000 mg/kg 투여군에서 대조군에 비해 유의성 있는 체중감소가 관찰되었다. 사료섭취량에 있어서는 죽염투여군에서 감소경향이 관찰되었다. 음수섭취량에 있어서는 수컷의 경우 죽염 500, 1000 및 2000 mg/kg 투여군과 대조물질투여군에서 유의성 있게 증가하였으며, 암컷의 경우 죽염 1000 및 2000 mg/kg 투여군과 대조물질 투여군에서 유의성 있게 증가하였다. 혈액학적 및 혈액생화학적 결과는 죽염투여에 기인한 변화는 관찰되지 않았다. 정자형태검사에서는 유의성이 없었으나 질세포검사에서 1000, 2000 mg/kg의 투여군에서 발정휴지기가 대조군에 비해 연장되었다. 비장세포 유약화 반응시험의 결과 세포성 체액성 모두 비장세포의 proliferation은 관찰되지 않았다.
    장기중량에 있어서 수컷의 경우 천일염 2,000 mg/kg 투여군에서는 뇌, 흉선, 폐, 간 및 우측 신장의 절대장기중량 및 상대장기중량비가 대조군과 비교시 유의성 있게 감소 또는 증가하였으며, 죽염 1,000 및 1,500 mg/kg 투여군에서는 악하선, 간, 우측신장 및 폐가 유의성 있게 감소 또는 증가하였으나 조직병리학적 검사결과 특별한 소견이 관찰되지 않았다.
    암컷의 경우 죽염 1500 및 2000 mg/kg 투여군에서 자궁중량의 감소가 관찰되었으나, 자궁의 독성소견은 관찰되지 않았다. 암컷의 자궁에 대한 조직병리학적 검사결과, 발정후기가 대조군 3/10례, 대조물질투여군 3/10례, 죽염 500, 1000, 1500 및 2000 mg/kg 투여군에서 각각 6/10례, 6/10례, 2/10례 및 6/10례가 관찰되었으며, 1500 및 2000 mg/kg투여군에서는 발정휴지기가 관찰되었다.
    계획부검 및 조직병리학적 검사결과, 죽염투여에 기인한 이상소견은 관찰되지 않았다.
    죽염에 대한 90일 경구 반복투여 독성시험을 실시한 결과, 죽염투여군에서 죽염투여에 의한 사료 및 음수섭취량의 변화가 관찰되었으며, 죽염 2,000 mg/kg 투여군에서는 수컷의 경우 약 10%의 체중증가억제가 관찰되었고, 암컷의 자궁중량의 감소 및 성주기의 규칙성에 대한 영향이 인정된다. 일반증상, 체중, 사료 및 음수섭취량, 혈액 및 혈액생화학적 검사, 장기중량 및 부검시 육안소견 등에서 2,000 mg/kg 용량에서의 천일염 및 죽염 투여군간의 차이는 관찰되지 않았다. 따라서, 죽염의 랫드를 이용한 13주 경구투여 독성시험을 실시한 결과, 암·수모두 무해용량(NOEL)은 250 mg/kg으로, 최대내성용량은 2,000 mg/kg으로 사료된다.
    [2]면역독성시험
    본 시험은 5~6주령 Hartley계 기니픽을 사용하여 죽염의 이상면역반응을 검색하고자 하였다. 군당 수컷 6마리 기니픽에 대조군, 천일염을 투여한 대조물질투여군, 죽염 200(저용량) 및 300(고용량) mg/kg 투여군, 혼합투여군(죽염 300 mg/kg+FCA(Freund's Complete Adjuvant)) 및 양성대조군으로 OVA (Ovalbumin) 5 mg/kg + FCA투여군을 설정하여 감작시켰다. 감작 후 15일에 야기항원을 정맥투여한 후 아나필락시스 쇼크반응을 관찰하였다. 동종수동피부 아나필락시스 반응시험은 아나필락시스 감작 후 채취한 항혈청을 10 배에서 5120 배까지 희석하여 피내 투여 후, 4시간 뒤에 야기항원을 정맥 주사하였다.
    아나필락시스 쇼크 반응시험 관찰결과, 대조군의 경우 코 문지르거나 핥음, 배뇨 또는 배변의 중등도의 증상이 관찰되었으며, 대조물질투여군의 경우 배뇨의 중등도 증상이 관찰되었다. 죽염 저용량군의 경우 모두 음성반응이 관찰되었으며, 고용량군에서는 코 문지르거나 핥음의 경등도 증상이 관찰되었다. 혼합투여군의 경우 배변 또는 찍찍거리는소리의 중등도 증상, 기모의 경등도의 증상이 관찰되었으나, 투여 후 15분 이후에 관찰된 증상으로 죽염투여에 의한 것이 아닌 자연적인 생리현상으로 판단된다. 반면, 양성대조군에서는 야기항원량 투여 즉시 모두 과호흡, 호흡곤란, 경련, 횡와 등의 강도의 전형적인 아나필락시스 쇼크반응을 보이다 10분 이내에 사망하였다.
    동종 수동 피부 아나필락시스 반응 관찰결과 대조군, 대조물질투여군 및 죽염투여군 모두 음성반응을 나타냈다. 반면, 양성대조군의 모든 동물에서는 최대희석배수 160배부터 양성반응이 나타났다. 이상의 결과로부터 죽염은 항원성을 유발하지 않는 것으로 판단된다.


  • 목차(Contents) 

    1. 표지 ...1
    2. 최종보고서 ...4
    3. 제출문 ...5
    4. 요약문 ...6
    5. SUMMARY ...8
    6. 목차 ...10
    7. 제1장 서론 ...11
    8. 제2장 국내·외 기술개발 현황 ...12
    9. 제3장 연구개발 수행내용 및 결과 ...13
    10. 1절 연구내용...
    1. 표지 ...1
    2. 최종보고서 ...4
    3. 제출문 ...5
    4. 요약문 ...6
    5. SUMMARY ...8
    6. 목차 ...10
    7. 제1장 서론 ...11
    8. 제2장 국내·외 기술개발 현황 ...12
    9. 제3장 연구개발 수행내용 및 결과 ...13
    10. 1절 연구내용 ...13
    11. 1. 연구내용(I) - 죽염의 90일 반복투여 독성시험 ...13
    12. 2. 연구결과(II) - 기니픽에서의 항원성 시험(죽염을 이용한 아나필락시스 쇼크 반응시험 및 동종 수동 피부 아나필락시스 반응시험) ...25
    13. 3. 연구결과 ...31
    14. 4. 고찰 및 결론 ...47
    15. 제4장 연구개발 목표달성도 및 대외기여도 ...52
    16. 1절 연구개발 목표 달성도 및 기대효과 ...52
    17. 2절 활용방안 ...52
    18. 제5장 연구개발결과의 활용성과 및 계획 ...53
    19. 가. 계량적 성과...53
    20. 나. 성과내용기술...53
    21. 다 . 활용계획...53
    22. 제6장 기타 중요변경사항 ...53
    23. 제7장 참고문헌 ...54
  • 참고문헌

    1. 전체(0)
    2. 논문(0)
    3. 특허(0)
    4. 보고서(0)

 활용도 분석

  • 상세보기

    amChart 영역
  • 원문보기

    amChart 영역