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보고서 상세정보

인간 p53 항암유전자를 이용한 새로운 유전독성물질검출 대체시험법 개발에 대한 연구
Application of Human p53 Tumor Suppressor System for New Genotoxic Substance Detection

  • 사업명

    식품의약품 안전성관리

  • 과제명

    인간 p53 항암유전자와 형질전환 동물을 이용한 새로운 유전독성물질 검출 대체시험법 개발에 대한 연구

  • 주관연구기관

    서강대학교
    Sogang University

  • 연구책임자

    양재명

  • 참여연구자

    이정하   김정호   김형구   김병철   이상민   민연주   신하연   박진용   구정규   이병걸   양동화   ...  

  • 보고서유형

    최종보고서

  • 발행국가

    대한민국

  • 언어

    한국어

  • 발행년월

    2002-11

  • 과제시작년도

    2002

  • 주관부처

    식품의약품안전청

  • 사업 관리 기관

    식품의약품안전청
    Korea Food & Drug Administration

  • 등록번호

    TRKO201000016520

  • 과제고유번호

    1470001664

  • 키워드

    유전독성물질 검출 법.항암유전자.통불세포.genotoxic substance detection method.p53.tumor suppressor gene.animal cell.

  • DB 구축일자

    2013-04-18

  • 초록 


    Pollution is one of the serious causes of human diseases. As a matter of fact, humans are expose d to diverse pollutants from air...

    Pollution is one of the serious causes of human diseases. As a matter of fact, humans are expose d to diverse pollutants from air, water, land , and foods, among which genetically toxic materials would be detrimental causes. Thus, it would be immediately required to understand the mechanisms of diseases caused by genotoxic s ub stances and to develop a convenient system to detect toxic chemicals . Up to now, Ames test has been an accepted method to detect genotoxic chemicals in general. However, some recent reports demonstrated that Ames test cannot detect genotoxics ubstances causing mutations in mammalian systems, because Sam on ella bacteria are used in the economic test. In the present study, therefore, we developed a novel system to detect genotoxic chemicals using the p53 regulation mechanism. When most of animal cells are exposed to genotoxic chemicals, p53 is induced and cell cycle is arrested. Using this p53 regulation mechanism, we constructed a novel vector containing r epeated p53-binding sites, followed by a luciferase reporter gene. The vector was electroporated into NIH3T3 celis, which were cultivated in a culture medium containing hygromycin (250 f,tg/mD until single colonies were formed. Among 45 coloni es survived, three cell lines (#12, #15, #25) expressed luciferase concentration-dependently when exposed to toxic chemicals. Among the three cell lines, the #12 cell line was extensively tested. When # 12 cells were exposed to reported genotoxic sub stances, such as benzo - alpha-pyrene, ENU (N-nitroso- N-ethylurea), and acrylamide, Luciferase was expressed 111 a concentration-dependent manner. Moreover, luciferase activities of the cells were significantly increased by treatment of divalent metal cations, lead ($Pb^{2+}$), cadmium ($Cd^{2+}$), or cobalt ($Co^{2+}$). These findings suggested that the novel detection system is capable of potently dete cting not only previously reported genotoxic chemicals, but also unidentified putative toxic chemicals . Continual efforts to improve the system as well as to extensive ly apply to examining putative genotoxic s ub s tances should be made in the future.


    대부분의 통물 세포가 유전독성물질에 노 출 되떤 유전자에 돌연변이가 발생하고 항암 유전자인 p53 이 발현하여 세 포 분열 을 억제하는 신호전달메커니즘 이 나타난다 이상과 같은 세포 내 기 작을 응용하여 p53 결합 부위를 포함 하...

    대부분의 통물 세포가 유전독성물질에 노 출 되떤 유전자에 돌연변이가 발생하고 항암 유전자인 p53 이 발현하여 세 포 분열 을 억제하는 신호전달메커니즘 이 나타난다 이상과 같은 세포 내 기 작을 응용하여 p53 결합 부위를 포함 하 는 염기서열과 루 시 퍼라제 리포터 유전자 로 구성된 벡터를 제조하였다 이 벡터를 NIH3T3 세포에 형질도입 시킨 후, 항생제인 hygromycin 처리 하에서 살아 남은 안정세포주 를 분리하였디, 총 457~ 의 콜로니 중에서 벤 조 피렌 (benzo - alpha-pyrene) 과 NEU (N - nitroso-N - ethy l urea) 와 같이 기존에 유전 독 성물 질로 증명된 약물을 처리하었을 때 루시퍼라제의 발현이 증가히-는 세 종류의 (#12, #15, #25) 안정세포주 를 분리하였다


  • 목차(Contents) 

    1. 표지 ...1
    2. 제출문 ...2
    3. 국문요약문 ...3
    4. SUMMARY ...5
    5. 목차 ...6
    6. 제1장 서론 ...7
    7. 제2장 국내.외 기술개발 현황 ...10
    8. 제3장 연구개발수행 내용 및 결과 ...11
    9. 제1절 연구내용...11
    10. 제2절...
    1. 표지 ...1
    2. 제출문 ...2
    3. 국문요약문 ...3
    4. SUMMARY ...5
    5. 목차 ...6
    6. 제1장 서론 ...7
    7. 제2장 국내.외 기술개발 현황 ...10
    8. 제3장 연구개발수행 내용 및 결과 ...11
    9. 제1절 연구내용...11
    10. 제2절 연구 방법...11
    11. 제3절 연구 결과...18
    12. 제4장 연구개발목표 달성도 및 대외기여도 ...31
    13. 제1절 연구개발목표 달성도...31
    14. 제2절 관련준야의 기술발전에의 대외기여도...32
    15. 제5장 연구개발결과의 활용성과 및 계획 ...33
    16. 가. 계량적 성과...33
    17. 나. 성과내용기술...33
    18. 다. 활용계획...33
    19. 제6장 기타 중요변경사항 ...34
    20. 제7장 참고문헌 ...35
  • 참고문헌

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