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보고서 상세정보

소 감마 인터페론 진단법 가이드라인 설정
Research on guidelines for practical use of the Gamma Interferon testing for Bovine tuberculosis

  • 사업명

    농림축산검역검사기술개발

  • 과제명

    소 감마인터페론 진단법 가이드라인 설정에 관한 연구

  • 주관연구기관

    농림축산검역본부
    Animal and Plant Quarantine Agency

  • 보고서유형

    최종보고서

  • 발행국가

    대한민국

  • 언어

    한국어

  • 발행년월

    2014-12

  • 과제시작년도

    2014

  • 주관부처

    농림축산식품부
    Ministry of Agriculture, Food and Rural Affairs(MAFRA)

  • 등록번호

    TRKO201600000701

  • 과제고유번호

    1545009021

  • 키워드

    소결핵.소 인터페론감마진단법.PPD.

  • DB 구축일자

    2016-04-30

  • DOI

    https://doi.org/10.23000/TRKO201600000701

  • 초록 


    ...


    5. 최종 연구결과 요약

    o 2012년 1월부터 2014년 11월까지 총 4881두의 한우 및 젖소를 대상으로 감마 인터페론 검사 (3760두)와 PPD접종 (4085두)을 이용하여 결핵 검사를 하였음.
    o 한우 ...

    5. 최종 연구결과 요약

    o 2012년 1월부터 2014년 11월까지 총 4881두의 한우 및 젖소를 대상으로 감마 인터페론 검사 (3760두)와 PPD접종 (4085두)을 이용하여 결핵 검사를 하였음.
    o 한우 2487두를 대상으로 PPD 접종(CFT, Caudal fold test) 전후로 감마 인터페론의 수치를 비교해본 결과, PPD 접종 전과 후 모두 감작 항원 종류(PPD A, PPD B)에 따른 인터페론 수치에 유의성 있는 차이가 있었음(P<0.0001).
    o 자연 감염우 57두를 대상으로 PPD 접종 전후의 각각의 항원에 대한 감마 인터페론의 수치를 측정한 결과, PPD 접종 이전에는 CFP-10, PPD B, ESAT-6, PPD A의 순으로 높은 반응이 나타났으며 PPD 접종 이후에는 CFP-10, ESAT-6, PPD B, PPD A 순으로 반응이 나타났음.
    o 혈액시료 상태에 따른 감마 인터페론 수치를 확인해본 결과, 용혈정도가 심할수록 발현되는 감마 인터페론의 수치가 감소하였음. 따라서 전혈의 용혈이 감마 인터페론 발현량에 영향을 주어 이를 이용한 우결핵 진단의 결과에도 영향을 미칠 수 있기 때문에 채혈 및 실험과정 중에 용혈이 일어나지 않도록 주의가 필요함.
    o 총 976두(2012년 1월 ~ 2014년 11월)의 한우 및 젖소를 부검을 통하여 육안 소견 확인 및 균 배양하였으며 242두(2012년 86두, 2013년 83두, 2014년 73두)에서 병변이 관찰되었으며 159두 (2012년 86두, 2013년 49두, 2014년 24두)에서 M.bovis 균이 분리되었음. 결과적으로 276두가 병변관찰 또는 균분리가 되어 결핵병으로 진단되었음.
    o 감마 인터페론 결과와 결핵병 유무의 일치도를 확인하기 위하여 부검하여 사후 평가를 실시하여 기존 A kit와 국내 개발 B kit를 비교한 결과 감마 인터페론 양성 개체에서 평균적으로 A kit는 62.26%(66두/106두),B kit는 82.54% (104두/126두)의 개체에서 병변이 관찰되거나 M. bovis균이 분리되었음.
    o PPD 접종 결과와 결핵병 유무의 일치도를 확인하기 위하여 부검하여 사후 평가를 실시한 결과 PPD접종 양성인 부검개체 중에서 59.67% (108두/181두)에서 병변이 관찰되었으며 35.91% (65두/181두)에서 균이 분리되었고 65.75% (119두/181두)가 병변이 관찰되거나 균이 분리되었음.
    o 감마 인터페론 검사법과 PPD접종 결과 비교를 위하여 감마 인터페론과 PPD접종을 모두 실시한 개체중 사후 평가 조사가 가능한 385두를 대상으로 비교분석 하였음. PPD 음성이며 감마인터페론 양성인 개체 중 71.43% (85두/119두), PPD 양성이며 감마 인터페론 음성인 개체 중 50.75% (34두/67두)에서 병변이 관찰되거나 균이 분리되었음. 그리고 PPD와 감마 인터페론이 모두 양성인 개체 중 74.56% (85두/114두)가 결핵병 양성으로 판단되었음.
    o 시판키트 (A kit)의 감마 인터페론 측정 결과는 육안 병변을 보이거나, M. bovis 균 분리를 결핵병 양성으로 판단하여 민감도와 특이도를 조사한 결과, 양성우 148두 중 98두에 대해서 양성을 보여 66.22%의 민감도를 보였으며, 음성우 2543두 중 47두에서 양성을 보여 특이도는 98.15% 이었음.
    o 국내 개발 키트(B kit)는 75.84% (113두/149두)의 민감도를 보였으며, 특이도는 99.84% (626두/627두,B kit) 이었음.
    o 시판키트 (A kit)과 국내 개발 키트(B kit)를 비교한 결과, 육안 병변을 보이거나, M. bovis 균 분리를 결핵병 양성으로 판단하였을 때 cut-off가 0.1일때 민감도 (75.84%)와 특이도 (99.84%) 모두 시판키트(민감도; 66.22%, 특이도 98.15%)보다 높았음.
    o 국내 개발 감마 인터페론 키트에 대해 각각의 cut-off에 따른 민감도와 특이도를 평가하기 위해 총 685마리의 혈액을 이용하여 실시한 검사 결과를 ROC 곡선을 그려 평가한 결과, AUC가 0.934로 나타나 감마 인터페론 검사법은 질병 판별력이 높은걸 알 수 있었으며 현재 기준인 0.1이 cut-off일 경우 민감도는 75.81%,특이도는 99.84%이었음. 그리고 cut-off를 0.05로 낮출 경우 민감도는 79.03%로 올라가고 특이도는 99.36%로 약간 감소하였음.
    o 비특이 감작항원으로 전혈시료의 활성여부를 판단할 수 있는 PWM (Pokeweed Mitogen)을 A키트와 국내 개발된 B키트에 적용해서 241두에 대해 실험한 결과, 220두 (91.3%)는 PWM 감작결과가 동일하였고, PWM 결과가 다르거나, 두 키트 모두에서 PWM의 Cut-off값 (ODpwm≥0.5이면 pass)을 넘지 못한 샘플을 제외한 나머지 혈액샘플 (220두)에서는 두 키트간의 결과 일치도가 98.1%를 나타냄.
    o 2014년 1~9월까지 젖소 및 한육우에 대해 감마인터페론 진단법을 이용한 전국단위 모니터링을 실시하였으며,젖소 144호 14,146두, 한육우 13,789호 168,724두 중, 농가(두수)양성율은 젖소에서 27.08% (4.26%),한육우에서 1.39% (0.68%) 였다. (젖소의 경우, 발생농장에 대해서만 실시하여 검진양성율이 높음)


  • 목차(Contents) 

    1. 표지 ... 1
    2. 농림축산검역검사기술개발 연구과제 최종결과보고서 ... 2
    3. Ⅰ. 연구배경 및 목표 ... 5
    4. 1. 연구배경 ... 5
    5. 2. 연구최종목표 ... 7
    6. 3. 연차별 연구개발 목표 및 내용 ... 8
    7. Ⅱ. 연구방법 및 수행전략 ... 9
    8. 1. ...
    1. 표지 ... 1
    2. 농림축산검역검사기술개발 연구과제 최종결과보고서 ... 2
    3. Ⅰ. 연구배경 및 목표 ... 5
    4. 1. 연구배경 ... 5
    5. 2. 연구최종목표 ... 7
    6. 3. 연차별 연구개발 목표 및 내용 ... 8
    7. Ⅱ. 연구방법 및 수행전략 ... 9
    8. 1. 재료 ... 9
    9. 2. 연구전략 및 방법 ... 9
    10. III. 연구결과 ... 10
    11. 1. PPD 접종 (CFT) 전·후 소에서의 감마 인터페론 수치 변화 ... 10
    12. 2. 혈액 시료 용혈에 따른 감마 인터페론 반응 확인 ... 12
    13. 3. 감마 인터페론과 PPD결과에 따른 균분리 및 결핵병소 관찰을 통한 사후평가 조사 ... 14
    14. 4. 감마 인터페론진단법의 민감도 및 특이도 조사 ... 21
    15. 5. PWM항원 적용 실험 결과 ... 25
    16. 6. 전국단위 감마인터페론 검진 결과 ... 25
    17. Ⅳ. 연구결과요약 ... 27
    18. V. 연구결과 활용실적 및 계획 ... 29
    19. 끝페이지 ... 29
  • 참고문헌

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