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보고서 상세정보

돼지 유래 iPS 표준작업서(SOP) 개발
Preparation of Standard Operating Protocol of porcine iPS

  • 사업명

    농림축산검역검사기술개발

  • 과제명

    돼지 유래 iPS 표준작업서(SOP) 개발

  • 주관연구기관

    강원대학교
    Kangwon National University

  • 보고서유형

    최종보고서

  • 발행국가

    대한민국

  • 언어

    한국어

  • 발행년월

    2014-11

  • 과제시작년도

    2014

  • 주관부처

    농림축산식품부
    Ministry of Agriculture, Food and Rural Affairs(MAFRA)

  • 등록번호

    TRKO201600000756

  • 과제고유번호

    1545008900

  • 키워드

    돼지.역분화 줄기세포.표준화 작업서.Pig.Induced plutipotent stem cell.Standard operating protocol.

  • DB 구축일자

    2016-04-30

  • DOI

    https://doi.org/10.23000/TRKO201600000756

  • 초록 


    The applications of porcine iPS have been limited because defined protocols for generation of porcine iPS are not known.
    The a...

    The applications of porcine iPS have been limited because defined protocols for generation of porcine iPS are not known.
    The aim of this study is to make efficient standard operating protocols for porcine iPS generation. For this, optimization studies for production and maintenance of porcine iPS were performed. Diverse media conditions were compared and freezing method were defined. Finally, standard operation protocol is produced.
    As results, knock out DMEM, 20% knock out serum replacement and fibroblast growth factor (10ng/ml) containing media was the most efficient for porcine iPS generation. Subsequently, efficient condition for iPS maintenance were studied because the iPS could not be well maintained in generation condition. Fetal bovine serum and fibroblast growth factor were necessary for iPS maintenance and stem cell factors showed synergy effect for long term maintenance of porcine iPS. Leukemia inhibitory factor did not demonstrated any effect for both porcine generation and maintenance. Porcine iPS presented pluripotent marker expression and it could be differentiated into three germ layers.
    In this study, the efficient protocols for porcine iPS generation and maintenance were produced. The iPS could be preserved by freezing methods. This studies are on the procedures for generation and maintenance of porcine iPS and it would be useful to researchers for production and use of porcine iPS


    돼지 역분화 줄기세포의 생산방식은 아직 정립되지 않았고 이러한 문제점으로 인해 역분화 줄기세포의 생산 효율이 떨어지고 연구팁별로 상이한 특성을 보이는 것이 문제이다. 본 연구의 궁극적 목적은 돼지 역분화 줄기세포 생산 방법을 확립하...

    돼지 역분화 줄기세포의 생산방식은 아직 정립되지 않았고 이러한 문제점으로 인해 역분화 줄기세포의 생산 효율이 떨어지고 연구팁별로 상이한 특성을 보이는 것이 문제이다. 본 연구의 궁극적 목적은 돼지 역분화 줄기세포 생산 방법을 확립하여 표준화 하는 것이다. 이를 위하여 돼지 역분화 줄기세포의 미분화 유지조건 확립, 배양조건 확립, 보존기법에 대한 연구를 수행하였다. 이를 토대로 돼지 역분화 줄기세포의 보존과 보급을 위한 표준 작업서를 제작하고자 한다.
    돼지 iPS생산을 위한 최적화 연구를 수행하였으며 다양한 조건을 비교하여 어떠한 조건에서 콜로니가 가장 많은 콜로니가 생성되는지 비교하였다. Knock out DMEM, 20% knock out serum replacement , FGF (10ng/ml)가 가장 효율적이었다. 하지만 돼지 iPS는 생산 조건에서는 잘 유지가 되지않았고, 유지 최적화 조건에 대한 연구를 수행하였다. 결과로 돼지 역분화 줄기세포는 FBS가 포함된 메디아에서 잘 유지가 되었다. 또한 FGF는 돼지 역분화 줄기세포의 생산 및 유지에 필수적이고, SCF는 FGF와 함께 사용하였을 때 역분화 줄기세포의 장기간 유지에 도움이 되었다. LIF는 돼지 역분화 줄기세포의 생산 및 유지에 큰 영향을 주지는 않았다. 본 연구를 통하여 효율적인 돼지 역분화 줄기세포 생산방식을 정립하였으며, 생산된 돼지 역분화 줄기세포는 만능성 특성 및 분화능을 나타냈다. 돼지 역분화 줄기세포는 동결보존하여 보관이 가능하였다.
    본 연구는 돼지 역분화 줄기세포 생산 및 유지의 효율적 방법에 대한 연구로 차후 연구자들에게 돼지 역분화 줄기세포의 생산 및 보급에 유용할 것으로 생각됨.


  • 목차(Contents) 

    1. 표지 ... 1
    2. 총괄 연구과제 요약 ... 2
    3. 연구결과보고서 요약문 ... 4
    4. Summary ... 5
    5. 제1장 총괄연구개발과제의 최종 연구개발 목표 ... 6
    6. 1.1 총괄연구개발과제의 목표 ... 6
    7. 1.2 총괄연구개발과제의 목표달성도 ... 7
    8. 1.3...
    1. 표지 ... 1
    2. 총괄 연구과제 요약 ... 2
    3. 연구결과보고서 요약문 ... 4
    4. Summary ... 5
    5. 제1장 총괄연구개발과제의 최종 연구개발 목표 ... 6
    6. 1.1 총괄연구개발과제의 목표 ... 6
    7. 1.2 총괄연구개발과제의 목표달성도 ... 7
    8. 1.3 국내·외 기술개발 현황 ... 8
    9. 제2장 총괄연구개발과제의 최종 연구개발 내용 및 방법 ... 14
    10. 4.1 연구내용 ... 14
    11. 제3장 총괄연구개발과제의 최종 연구개발 결과 ... 19
    12. ■ 돼지 iPS생산을 위한 배양조건 확립 ... 19
    13. ■ 돼지 iPS 생산 프로토콜 확립 ... 20
    14. ■ 돼지 iPS 유지를 위한 defined media 확립 및 미분화 유지조건 확립 ... 20
    15. ■ 돼지 역분화 줄기세포 확립 ... 21
    16. ■ 보존기법 연구 ... 22
    17. ■ 무지지세포 조건 배양불가 ... 23
    18. ■ 이식면역학적 특성 분석 ... 23
    19. 제4장 총괄연구개발과제의 연구결과 고찰 및 결론 ... 23
    20. 제5장 총괄연구개발과제의 연구성과 ... 24
    21. 5.1 활용성과 ... 24
    22. 5.2 활용계획 ... 26
    23. 제6장 기타 중요변경사항 ... 27
    24. 제7장 참고문헌 ... 27
    25. 제8장 첨부서류 ... 27
    26. 끝페이지 ... 27
  • 참고문헌

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